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探讨荧光定量 PCR 法与免疫胶体金法用于骨质疏松症手术住院患者感染监控的诊断价值论文

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2024-04-30 09:50:52    来源:    作者:zhoudanni

摘要:住院患者感染是医疗机构中一项严重的医疗 安全问题,不仅给患者带来痛苦,还增加了医疗成 本和治疗难度[1] 。随着抗生素耐药性的增加和新兴 感染病原体的出现 ,感染控制变得更加复杂和紧 迫 。 因此,建立有效的感染监控与预防体系对于保 障患者安全和提高医疗质量至关重要 。荧光定量 聚 合 酶 链 式 反 应(Polymerase Chain Reaction, PCR) 法作为感染疾病诊断的关键手段之一,具有高度的 敏感性和特异性,能够快速准确地检测病原体,指 导临床医生及早制订合理的治疗方案[2] 。

  [摘要] 目的 本研究旨在探讨荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)法与免疫胶体金法 检测用于骨质疏松症进行手术治疗住院患者感染监控的临床效果 。方法 选取 2020 年 3 月—2023 年 4 月曲 靖市第一人民医院收治的 180 例骨质疏松症进行手术治疗疑似住院感染患者作为研究对象,所有患者均先 后接受荧光定量 PCR 法与免疫胶体金法检测,以细菌培养结果作为金标准,比较两种方法的检出率,评估两 种检查方法的诊断效能 。结果 荧光定量 PCR 法的检验准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分 别 为 96.67%、89. 19%、98.60%、94.29%、97.24%,免 疫 胶 体 金 法 分 别 为 82.78%、43.24%、93.01%、61.54%、 86.36%,荧光定量 PCR 法的检验准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均明显高于免疫胶体金法 检验,差异有统计学意义(χ2= 18.827、17.458、5.567、10.124、11.533.P 均<0.05)。 结论 荧光定量 PCR 法检验在 骨质疏松症进行手术治疗住院患者感染监控中具有良好的诊断效能 。在骨科住院患者感染监控中予以微 生物检验干预,有助于基于检验结果进行及早诊断和治疗,进而降低感染发生率和传播风险。

  [关键词] 荧光定量聚合酶链式反应法,住院患者,骨质疏松症,免疫胶体金法,病原菌

  住院患者感染是医疗机构中一项严重的医疗 安全问题,不仅给患者带来痛苦,还增加了医疗成 本和治疗难度[1] 。随着抗生素耐药性的增加和新兴 感染病原体的出现 ,感染控制变得更加复杂和紧 迫 。 因此,建立有效的感染监控与预防体系对于保 障患者安全和提高医疗质量至关重要 。荧光定量 聚 合 酶 链 式 反 应(Polymerase Chain Reaction, PCR) 法作为感染疾病诊断的关键手段之一,具有高度的 敏感性和特异性,能够快速准确地检测病原体,指 导临床医生及早制订合理的治疗方案[2] 。在过去的 几十年中 ,随着检验技术的不断发展 ,荧光定量 PCR 法 检 验 已 经成 为感染 控 制 和 预 防 中 不 可 或 缺 的工具[3] 。基 于此 ,本研究选取 2020 年 3 月—2023 年 4 月曲靖市第一人民医院收治的 180 例骨质疏松 症进行手术治疗疑似住院感染患者为研究对象,探讨荧光定量PCR法检验的临床应用效果,现报道如下。

  1 资料与方法

  1.1 一般资料

  选取本院收治的 180 例骨质疏松症进行手术治 疗疑似住院感染患者作为研究对象,所有患者均先 后接受荧光定量 PCR 法与免疫胶体金法检测 。其中男 98 例 ,女82例 ;年 龄 21~71 岁 ,平 均(42.83± 5.79)岁 。本研究经医院医学伦理委员会批准。

  1.2 纳入与排除标准

  纳入标准:年龄≥18 岁;愿意参与本研究并签署 知情同意书;精神意识状态正常;无血液系统疾病; 无严重免疫系统疾病或免疫抑制症状。

  排除标准:其他 明 确感染病因的患者 ,如外 伤 感染 、手术感染等;在研究期间已接受抗生素治疗 的患者;患有严重肝肾功能损害或其他重要器官功 能障碍的患者。

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  1.3 方法

  荧光定量PCR法检测仪器为ABI公司的7500型荧光定量 PCR 仪,具体检测步骤如下:收集样本 使用特定的核酸提取试剂盒从样本中提取出核酸, 将 提 取 出 的 RNA通过反转录酶的作用转化为 cDNA 。根据目标基因序列,设计特异性引物,将引物 、dNTPs、MgCl2、荧光染料、Taq 酶 等 按 照 一 定 比 例加入到 PCR 反应液中,将配置好的 PCR 反应液加 入到 PCR 仪中,按照设定的程序进行扩增反应。根据Ct值和标准曲线,判断样本中是存在目标基因,并计算出其含量 。免疫胶体金法具体检测步骤 如下:将一定浓度的氯金酸溶液与还原剂(如柠檬 酸三钠)混合,加热搅拌,将待标记的抗原或抗体与 胶体金溶液混合形成复合物 。将标记好的复合物 用洗涤液洗涤数次,去除未结合的胶体金颗粒和多 余的抗原或抗体 。将洗涤后的复合物与相应的抗 体或抗原反应,形成抗原抗体复合物 。用肉眼或光 学显微镜观察溶液的颜色变化,判断待测样本中是 否存在目标抗原或抗体 。细菌培养法检测步骤如 下:采集样本进行稀释 、离心以及加入抑菌剂等处 理,并接种到适宜的培养基上 。将接种好的培养基 放入培养箱中进行培养 。观察培养基上细菌的生 长情况和形态特征,如菌落大小 、形状 、颜色等,判 断目标细菌的种类。

  1.4 观察指标

  ① 统计比较两种检验方法的阳性检出率 。② 比较两种检验方法的诊断效能,包括准确度 、灵敏 度、特异度、阳性预测值、阴性预测值等项目 。具体计算方法如下:准确度 =(真 阳 性 例 数 + 真 阴性 例 数)/总例数×100%;灵敏度=真阳性例数/(真阳性例数+假阴性例数)×100%;特异度=真阴性例数/(真阴性例数 +假阳性例数)×100%;阳性 预测值=真阳性例数/(真阳性例数+假阳性例数)×100%;阴性预测值=真阴性例数/(真阴性例数+假阴性例数)× 100%[4]。

  1.5 统计方法

  采用 SPSS 20.0 统计学软件分析数据,诊断效能 诊断结果为计数资料,以例数(n)和率(%)表示,行 χ2 检验 。P<0.05 为差异有统计学意义。

  2 结果

  2.1 两种诊断方法检验结果比较

  细菌培养法检验结果显示阳性 37 例,荧光定量 PCR 法结果显示阳性 35 例,免疫胶体金法结果显示 阳性 26 例 。见表 1.

  2.2 两种诊断方法的诊断效能比较

  荧光定量 PCR 法 的 检 验 准 确度 、灵 敏度 、特 异 度、阳性预测值、阴性预测值均明显高于免疫胶体金 法检验,差异有统计学意义(P 均<0.05)。 见表 2.

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  3 讨论

  住院患者感染是医疗机构面临的严重挑战之 一 。随着医疗技术的进步和患者病情的复杂化,住 院患者感染的发生率逐渐上升,给患者的康复和治 疗带来了重大障碍[5] 。感染不仅导致骨质疏松症进 行手术治疗患者身体状况的进一步恶化,还会延长 患者住院时间和增加医疗费用 。抗生素的广泛使 用导致细菌产生耐药性,使得原本可治愈的感染病 变为难治性疾病,严重影响患者的治疗效果和生存 率[6] 。面对这一严峻的形势,建立科学的感染监控 与预防体系显得尤为重要。

  荧光定量 PCR 法检验可以快速确定感染的病原体 、判定其对抗生素的敏感性,从而进行个体化治 疗[7-8] 。本研究结果显示,细菌培养法检验结果显示 阳性 37 例,荧光定量 PCR 法结果显示阳性 35 例,免 疫 胶 体 金 法 结 果 显示 阳 性 26 例 ,这说 明荧 光 定 量 PCR 法检验可提高病原菌检出率 。 曲奎尧等[9]研究 结果显示,免疫胶体金法的 MP 检测阳性率为 46.3%, 明显低于荧光定量 PCR 法检验的阳性率(73.9%)(P< 0.05)。 荧光定量 PCR 法的检验准确度、灵敏度、特异 度、阳性预测值、阴性预测值均明显高于免疫胶体金 法检验(P 均<0.05),提示荧光定量 PCR 法检验具有 良好的检验效能,在感染监控中对于早期发现感染、 及时采取干预措施具有重要意义 。刘小琳等[10]研究 结果显示,荧光定量 PCR 法诊断 CT 感染的灵敏度、 阴 性 预 测 值 、准 确 度 、Kappa 值 分 别 为 96.47%、 60.00%、96.11%、0.700.均显著高于免疫胶体金法的 85.56%、27.27%、88.89%、0.323(P 均 <0.05),与 本 研 究结果具有较高一致性 。荧光定量 PCR 法提高病原 菌检出率及检验效能的原因主要有以下几点:① 荧 光定量 PCR 法可以检测到非常低浓度的病原体,因 此 ,可以更早地发现感染 ,及时进行干预和治 疗[11-12];② 荧光定量 PCR 法的特异度也比免疫胶体 金法更高 。荧光定量 PCR 法可以特异性地扩增目标 病原体的核酸序列,减少非特异性扩增和交叉反应 的可能性[13];③ 荧光定量 PCR 法可以进行定量检测, 通过测定荧光信号的强度和变化,可以计算出起始 模板的数量 ,从而了解感染的严重程度和治疗 效果[14-15]。

  综上所述,荧光定量 PCR 法检验在骨质疏松症 进行手术治疗住院患者感染监控中具有显著的临 床效果 。通过快速准确地检测病原体和合理选择 抗生素,有助于降低传播风险。

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