摘要 目的：研究鸿茅药酒的急性和亚慢性毒性反应，为评价其安全性提供试验依据。方法：对鸿茅药酒(上 市品)进行大鼠单次和 13周经口毒性试验。结果：大鼠单次给予鸿茅药酒超过 20mL/kg , 可引起步态不稳、 嗜睡、俯卧、侧躺、死亡等严重毒性反应。连续 13周给予鸿茅药酒，与灭菌注射用水对照组动物比较，1 、3 、6 mL/kg组大鼠的每周体重、摄食量，给药末期及恢复期的血液学、血生化指标、脏器重量，均无明显差异;除 动物自发病变，6mL/kg鸿茅药酒组动物未见明显毒性病理改变。结论：鸿茅药酒对大鼠急性经口最大耐 受剂量约为 20mL/kg;大鼠连续 13周每日给予 6mL/kg鸿茅药酒，未见明显不良反应。

　　关键词 鸿茅药酒 急性 亚慢性 毒性反应

　　AcuteandSubchronicToxicityStudyofHongmaoYaojiu onRats XuXiao-shuang1 , Liu Meng1 , HanShuang2 , Liu Huan2

　　( 1.CenterforNewDrugSafety EvaluationandReasearch , ChinaPharmaceuticalUniversity , Nanjing

　　211198 , China ;2. MongoliaHongmao PharmaceuticalCo. , Ltd. , Wulanchabu013750 , China)

　　Abstract: Objective: Toinvestigatetheacuteandsubchronictoxicity reactionsofHongmaoYaojiu andprovideexperimentalbasisforevaluatingthesafety. Methods: Single-doseand13-weekoral toxicit y tests were conducted on rats. Results: Single-doseadministrationof Hongmao Yaojiu exceeding20 mL/kginratscauseserioustoxicreactionssuchasunsteadygait , lethargy , prone position , lateral l ying , and death. Whenrats wasgiven Hongmao Yaojiucontinuously for 13- week , and compared with the control group receiving sterile injection water , there were no significantdifferences in weekly bod y weight , food intake , hematological and blood biochemical indices , organ-body ratioattheendand recoveryperiodofadministration amongthe1 , 3 , and6 mL/kggroups. Exceptforidiopathy , nosignificanttoxicpathologicalchangesinthe6mL/kgdose group . Conclusion: ThemaximumtolerateddoseofHongmaoYaojiuinratsviaoral administration isabout20mL/kg , andcontinuousadministrationofHongmaoYaojiufor3 monthsatadoseof6 mL/kgdidnotshowany significantadversereactionsin rats.

　　Keywords: HongmaoYaojiu , acute , subchronic , toxicit y reactions

　　药酒在我国有渊源的文化传统和广泛的消费群体， 鸿茅药酒(国药准字 Z15020795) 作为传统药酒的历史可 追溯至清代乾隆年间。据凉城通史记载，中医王吉天在 鸿茅古镇制成一种药酒，治病救人。结合传统中医药精 华和现代中药工艺制备成的鸿茅药酒，广泛应用于风寒 湿痹，筋骨疼痛，脾胃虚寒等临床病症[1] 。本研究遵循 《药物非临床研究质量管理规范》在 GLP条件下对鸿茅药酒的急性毒性和亚慢性毒性进行研究，为上市后科学 评价其安全性提供参考[2-3] 。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料、 仪器和试剂

　　受试物：鸿茅 药 酒(市 售 品)，批 号 20180202 , 内 蒙古鸿茅药业有限责任公司 。鸿茅药酒辅料(37%乙醇)，批号 20181014 ，内蒙古鸿茅药业有限责任公司。

　　实验动物：浙江维通利华提供 SPF级 SD 大 鼠， 生产许 可证 号 为 SCXK(浙)2019-0001 ，质量 合 格 证 编 号 1909200048 、1909270053 。 饲 料 来 自 江 苏 协 同 医药生 物 工 程 有 限 公 司，生 产 许 可证号为苏饲证 (2019)01008 ，批 号 20190620 、20191031 。 饲 养 于 中 国药科大学新药安全评价研究 中心屏障动物房，使用 许可证号为 SYXK(苏)2018-0019 。

　　仪器设备：SIMENS全自动血液分析仪和全自动 生化分析仪、BehnkElektronik全 自 动凝 血 分 析 仪、 MEDICA电解质分析仪、SARTORIUS电子天平等。

　　试剂：PT 、APTT 、TT 、FIB检测试剂 盒，正 常值 质控 品，异 常 值 质 控 品 。 Retic 、BASO 、HGB 、RBC/ PLT 、 PEROX1 、 PEROX2 、 PEROX3 、 PEROX SHEATH 试剂 包，正 常 值 质 控 品、异 常 值 质 控 品。 AST 、ALT 、ALP 、ALB 、GGT 、TBI 、TGL 、TP 、BUN 、 CREA 、CKI 、CHOL 、GLUC检测试剂盒，BIO-RAD1 多项质控，BIO-RAD2多项质控。

　　1.2 试验方法

　　1 . 2 . 1 大鼠急性经口毒性试验

　　50只 SD大鼠按体重随机分为 5组，每组 10只， 雌雄各半 。 采用最大耐 受量法，经 口给 予 10 、20 、40 mL/kg鸿茅药酒，40 mL/kg辅料及 40 mL/kg灭菌 注射用水 。观察给药后 2周内死亡情况、毒性反应症 状等，对死亡/濒死动物进行组织病理学检查。

　　1 . 2 . 2 大鼠 13周重复经口毒性试验

　　150只 SD 大 鼠 按 体 重 随 机 分 为 5 组，每 组 30 只，雌雄各半 。 分别经 口给 予 1 、3 、6 mL/kg鸿茅药 酒，6mL/kg灭菌注射用水及 6mL/kg辅料;连续给 药 13周，恢复 31天 。试验期间，进行一般临床症状、 眼科检查、体重、摄食量的测定;给药期结束及恢复期 结束，采集血样进行血液学、血生化指标 的检测，检查 各系统脏器的大体改变并称取部分脏器湿重，计算脏体比;对灭菌注射用水组、辅料对照组及高剂量组动 物剖检脏器进行组织病理学检查。

　　1.3 统计分析

　　数据采用 SPSS22.0统计软件进行统计学处理， 计量资料 以均数 ±标准差(Mean±SD)表示，多组 间 比较 采 用 单 因 素 方 差 分 析( ANOVA)和 秩 和 检 验 (Kruskal-WallisH)。

　　2 结果

　　2.1 大鼠急性经口毒性试验

　　试验期间，40 mL/kg鸿茅药酒组 4只雄 鼠、4只 雌鼠 出 现死 亡/濒死;40 mL/kg辅料 组 2只 雄 鼠、2 只雌鼠出现死亡/濒死 。 10 、20mL/kg鸿茅药酒组动 物未见死亡 。 受试物相关毒性症状主要为步态不稳、 嗜睡、俯 卧、侧躺，死亡动物 。 SD大鼠单次经口给予 鸿茅药酒，最大耐受剂量约为 20mL/kg 。

　　2.2 大鼠 13周重复经口给予鸿茅药酒毒性试验

　　2 . 2 . 1 一般临床症状

　　试验期 间，大 鼠连续 13周经 口给予 1 、3 、6 mL/ kg鸿茅药酒，6 mL/kg辅料及恢复 31天，未见异常 症状，未见受试物相关动物死亡。

　　2 . 2 . 2 鸿茅药酒对大鼠体重的影响

　　给药前，各组同性别的动物极大和极小体重与平 均体重比较均不超过 10% ，组 间无统计学差异 。 与 6 mL/kg灭菌注射用水组 比较，6 mL/kg辅料组雄 鼠 给药第 4 、8周体重 降低并有统计学差异(P<0.05)。 各组雌性动物每周体重组间无统计学差异，见表 1 。

　　雄性动物，自给药第 4周 期 至试验 结束，6 mL/ kg辅料组雄鼠及 6mL/kg鸿茅药酒组雄鼠的平均体 重略低于 6mL/kg灭菌注射用水组 。 尽管这些体重 变化可能与给药有关，但程度轻微，较对 照组 降低不 超过 10% 。鸿茅药酒高剂量组及辅料组动物整体呈 增长趋势，未见明显降低。

　　2 . 2 . 3 鸿茅药酒对大鼠摄食量的影响

　　与 6mL/kg灭菌注射用水组 比较，3 mL/kg鸿 茅药酒组雄鼠在给药后第 1 、4 、13周摄食量降低(P< 0.05);6mL/kg鸿茅药酒组雄鼠给药后第 4 、8 、13周 摄食量降低(P<0.05);6mL/kg辅料组雄 鼠给药后 第 4 、8周摄食量降低(P<0.05)。 各组雌性动物每周 摄食量组间无统计学差异，见表 2 。 摄食量 降低程度 轻微，与动物体重变化相一致。

　　2 . 2 . 4 鸿茅药酒对大鼠血液学的影响

　　连续 13周经口给予 1 、3 、6mL/kg鸿茅药酒及 6 mL/kg辅料及恢复 31天，6mL/kg鸿茅药酒组雄 鼠 中性粒细胞百分比轻度增高、淋 巴细胞百分 比轻度 降 低，停药 31天后可恢复 。连续 13周经 口给予 6mL/ kg辅料，也可见大鼠中性粒细胞百分 比轻度增高，淋 巴细胞百分比轻度降低，见表 3 。

　　2 . 2 . 5 鸿茅药酒对大鼠血生化的影响

　　连续 13周经口给予 1 、3 、6mL/kg鸿茅药酒及 6 mL/kg辅料，3 mL/kg鸿茅药 酒 组雄 鼠 的 总胆 固 醇 升高(P <0.05)，该指标变化程度轻微，无 明显 的剂 量相关性，见表 4 。

　　2 . 2 . 6 鸿茅药酒对大鼠脏器重量的影响

　　连续 13周经口给予 1 、3 、6mL/kg鸿茅药酒及 6 mL/kg辅料，6 mL/kg辅料组雄 鼠 的 肾脏脏体 比 升 高(P <0.05);动物脏器重量变化轻微，无 明显剂量 相关性，见表 5 。

　　2 . 2 . 7 组织病理学检查

　　给药 13周及恢复 31天时分别进行大体解剖，未 见受试物相关异常病变 。组织病理学检查高剂量组、 辅料对照组和空白对照组动物所有剖检脏器，各组 出 现肾脏间质炎细胞浸润、右 肾局灶性炎细胞浸润，急 性前列腺炎，肝脏局灶性炎细胞浸润、脂肪变性、局灶 性坏死，胸腺出血，垂体囊肿，颈部淋巴结淤血，胸腺 萎缩，心脏局灶性炎细胞浸润，肺脏局灶性炎细胞浸 润、淤血，脓肿，以上病变无 明显 的剂量效应关系，发 生率低，考虑为动物的自发病变。

　　连续 13周经口给予 6mL/kg鸿茅药酒及 6mL/ kg辅料及恢复 31天，未 引起大 鼠脏器 明显 的毒性病 理改变。

　　3 讨论

　　中成药上市后再评价是指根据医药学的最新技 术水平和方法，对 已批 准 上 市 的 中 成药是否符合安 全、有效、经济的合理用药原则做 出科学评价，是药 品 研究的重要环节之一[4] 。 鸿茅药酒 由红 曲、小茴香、 肉桂、高良姜、荜 茇 等 六 十七 味 药 材 组 成，辅 料 为 白 酒、红糖、冰糖的复方制剂(乙醇含量为 36~38%)[5]。 临床上使用方法为口服，一次 15mL，一 日 2次，每毫 升含生药量 14.444mg 。 以生药量计，按照人和大 鼠 体表面积 公 式 进 行 剂 量 折 算，临 床 日 用 量 为 6. 19 mg/kg;大鼠 体 重 以 0. 2kg计，大 鼠 等 效 日 用 量 为 39.00mg/kg(相当于 2.7mL/kg鸿茅药酒)。

　　本次试验结果显示，鸿茅药酒大 鼠的急性毒性试 验的耐受量为 20 mL/kg(约 临床 日用量 的 7.4倍)。 13周亚慢性试验可见 6 mL/kg剂量下(约 临床 日用量的 2.2倍)大 鼠生长正常及活动 良好，未见动物死 亡或出现中毒症状 。本研究提示广大使用人群，对于 市售鸿茅 药 酒，应遵照说明书用量饮用[1] 。 单 次 大 量、长期超限饮用都可能带来安全危害。

　　给予 37%乙醇的辅料组动物出现持续性中性粒 细胞百分比轻度增高，淋巴细胞百分 比轻度 降低等轻 度毒性症状，提示鸿茅药酒的急性和亚慢性毒性可能 与辅料有关 。使用上市产品作为受试物，难 以提高药 酒中药材的摄入倍数，可本研究基础上进一步进行药 酒浓缩液的长期摄入安全性研究。

　参考文献

　　[1] 魏益谦，刘 兆 兰，侯文斌等.服用鸿茅药酒自我判 断疗效和安全性的横 断 面 调 查研 究 [J] . 北 方 药 学，2022 , 19(04):4-9 .

　　[2] 国家食品药品监督管理局.药物单次给 药毒性研 究技术 指 导 原 则 [EB/OL] . (2014-05-13) [2022- 08-08] .https://www.nmpa. gov.cn/xxgk/ggtg/ qtggtg/20140513120001448.html.

　　[3] 国家药品监督 管理局.药物非 临床研 究质量 管理 规 范 [ EB/OL] . (2022-03-24) [2022-08-08] . https://www. nmpa. gov. cn/xxgk/ggt/ glprzhgg/20220325153457121.html.

　　[4] 凌霄，李春 晓，李 学林等.中成药上市后临床安全 性再评价研究的思考[J] . 中华 中 医 药杂 志，2021 , 36(09):5363-5367 .

　　[5] 刘晓华，王建国，木喜叶勒等.鸿茅药酒中总氨基酸含 量测定[J] . 北方药学，2020 , 17(08): 22-24.