摘  要：文章探讨血清角蛋白 18（KRT18）在肺腺癌患者体内的表达水平及其对肺腺癌的诊断价值。通过 ELISA 法检测 30 例肺腺癌患者及 30 例健康对照者的血清KRT18 水平，并整合生物信息学分析验证。结果显示 ，肺腺癌组的血清 KRT18 水平（150.25±21.32 ng/mL）显著高于对照组（51.56± 10.04 ng/mL, P<0.001）。其表达水平与 TNM 分期密切相关，晚期（T3&T4、N1&N2&N3 及M1）患者水平显著升高（P<0.01～0.001）。受试者工作特征（ROC）曲线分析显示，其诊断 AUC 值为0.783（95% CI: 0.545～0.930）。结果显示，肺腺癌患者血清 KRT18 水平的升高与肺腺癌的侵袭性临床病理特征有关，表明血清KRT18 水平具有充当肺腺癌诊断与预后生物标志物的潜力。

       关键词：血清；肺腺癌；KRT18；TNM 分期

 肺腺癌（LUAD）作为全球癌症死亡的主要原因，发病率逐年上升。手术、化疗、放疗和靶向治疗等方法是常用治疗手段，但因早期诊断困难和肿瘤异质性，治疗效果有限。因此，开发新的生物标志物和早期诊断方法尤为重要。

       近年来，许多生物标志物被提出用于肺癌的早期诊断和预后评估。其中，KRT18 作为细胞角蛋白，与多种肿瘤的发展密切相关，在肺腺癌中更是表现突出。研究表明，KRT18 的表达水平与肿瘤的侵袭性、转移性显著相关，是潜在的生物标志物。然而，关于 KRT18 在肺腺癌中具体作用及临床价值的研究较为有限[1]。

       本研究采用临床样本采集、血清 KRT18 水平检测、生物信息学分析等方法，分析临床样本和公共数据库数据，探讨血清 KRT18 在肺腺癌患者体内的表达特征及其与 TNM 分期的关系，以期为生物标志物研究和临床诊断提供新的方法论。

        1   研究对象和方法

        1.1   研究对象

       本研究选取 2024 年 1 月—8 月在南华大学附属邵阳医院就诊的 30 例确诊为肺腺癌的患者，并随机选择同期 30 例健康体检者作为对照组。所有参与者均签署了书面知情同意书。肺腺癌患者需符合以下条件：①病理学确诊为原发性肺腺癌；②在此之前未接受过任何形式的化疗、放疗、靶向或免疫治疗。排除标准则包括：①合并其他类型的恶性肿瘤；②曾因肺癌接受过任何抗肿瘤治疗；③存在严重的心脏、肝脏、肺部、肾脏或脑功能不全问题，以及精神疾病。

        1.2   研究方法

        1.2.1   静脉血液样本采集与检测

       对符合纳入标准的肺腺癌患者及健康对照组患者，于清晨空腹状态下抽取5 mL 外周静脉血。采集血样后，1 h 内进行低速离心，2 000 r/min 离心25 min。离心后取上清液进行血清保存，并置于-80 ℃冰箱中。随后，采用酶联免疫吸附测定（ELISA）方法及相应的试剂盒（碧云天生物技术有限公司）检测血清中KRT18 的表达水平。

       1.2.2   生物信息学分析

       数据来源 UCSC XENA数据库，包括 GTEx 正常 7 568 例、TCGA癌旁 727 例和 TCGA 肿瘤9 807 例。所有数据均经Toil 流程统一处理。

       1.3   统计学分析

       基于公共数据库分析血清 KRT18 的统计值，采用 Mann-Whitney U 检验进行泛癌分析。多组之间采用方差分析，两组之间采用 t 检验。使用 pROC 包对数据进行 ROC 曲线分析，结果用 ggplot2 包进行可视化。

         2   结果

        2.1   生物信息学分析 KRT18 在不同肿瘤类型中的表达

        通过分析 XENA 数据库 ，发现 KRT18 mRNA在多个癌种中表达失调，在 LUAD 和 LUSC 中呈现高表达水平（见图 1A）。图 1B 和 1C 显示，在 LUAD非配对和配对样本中，肿瘤组 KRT18 mRNA 的表达均出现上调现象。

        2.2   血清 KRT18 水平在正常组和肺腺癌患者组中的表达

        研究发现，血清 KRT18 水平在正常组与肺腺癌患者组间的差异具有统计学意义（P<0.001）。肿瘤组患者血清 KRT18 质量浓度为 150.25 ±21.32 ng/mL，显著高于正常对照组的 51.56± 10.04 ng/mL ，表明KRT18 在肺腺癌患者血清中呈明显升高趋势（见表 1）。

                                                           表 1   正常组和肺腺癌患者组中血清 KRT18 的表达

        2.3   血清 KRT18 水平与肺腺癌 TNM 分期的关系

        结果显示，随着 TNM 分期推进，KRT18 在血清中的表达水平逐渐升高。T3&T4 期、淋巴结转移阳性（N1&N2&N3）及远处转移（M1）患者分别为185.56± 28.34  ng/mL、169.25 ±29.22  ng/mL  和 196.19 ±25.14 ng/mL，均显著高于各自对照组（P<0.01～0.001），提示 KRT18 与肿瘤侵袭转移密切相关（见表 2）。

                                                     表 2   不同 TNM 分期的肺腺癌患者血清 KRT18 的表达水平

 2.4   RCO 曲线分析 KRT18 对肺腺癌的诊断价值

        血清 KRT18 水平对肺腺癌的诊断具有一定准确性，其曲线下面积（AUC）=0.783，95%置信区间（CI）为 0.545～0.930（见图 2）。

        3   结论

       本研究首次揭示了肺腺癌患者血清 KRT18 显著升高的现象——其与 TNM 分期密切相关，填补了肺腺癌早期诊断和预后评估的知识空白。尽管已有研究探讨 KRT18 在多种癌症中的表达，但对其在肺腺癌中具体作用及诊断价值的分析仍较为欠缺。结果显示，KRT18 在肺腺癌患者体内的表达水平显著高于健康对照组，且随 TNM 分期推进上升，揭示KRT18 在肿瘤进展中发挥着重要作用。这与其他肿瘤类型的研究结果一致[2-3] 。此外，研究结果对临床实践具有重要应用价值，KRT18 升高可帮助医生尽早识别肺腺癌患者，提高其生存率和生活质量。结合 KRT18 与传统 TNM 分期评估，制定个性化治疗方案，改善治疗效果。这一发现为临床提供了新的检测手段，并为肺腺癌早期诊断和治疗策略优化提供了依据[4]。

       然而，本研究存在样本量较小、缺乏长期随访数据的缺陷。尽管生物信息学方法和临床数据增强了结果的可靠性，但仍需扩大样本量并纳入多中心的长期随访数据，以验证 KRT18 对肺腺癌的诊断和预后价值。此外，KRT18 在不同肿瘤类型中的表达模式及其机制值得深入研究，以更好地理解其在癌症发展中的作用[5]。

       综上所述，本研究表明，KRT18 水平在肺腺癌患者体内显著升高，显示了其作为潜在生物标志物的诊断和预后评估价值。未来研究应探讨 KRT18 的作用机制及其在临床实践中的应用前景，为肺腺癌的早期诊断和个性化治疗提供新思路。

       参  考  文  献

［1］ LI Y J, ZENG M, QIN Y N, et al. The role of KRT18 in lung adenocarcinoma development: Integrative bioinformatics and experimental validation［J］.Discover Oncology, 2024, 15(1): 1-16.

［2］ 孟俊宏, 高 明悦, 龚程, 等 . 结直肠癌组织 KRT15、 KRT18 蛋白表达与临床病理特征和预后的关系分析［J］. 国际检验医学杂志,2024, 45(4): 435-440.

［3］ 闫成玉. KRT18 基因通过调控 MMP9 基因的表达进而影响内质网应激下的食管鳞癌细胞存活［D］. 开封: 河南大学, 2023.

［4］ GANJAYIM S, FRANK S W, KRAUSS T A, et al. Skeletal   muscle   adaptations   following   eccentric contractions are not mediated by keratin 18［J］.Journal of Applied Physiology(1985), 2024, 137(4): 903-909.

［5］ 高杨. KRT18 增强 c-Myc 通路促进胰腺癌增殖、侵袭、转移的分子机制研究［D］. 沈阳: 中国医科大学, 2022.