[摘要]目的分析全血γ-干扰素释放试验联合全自动医用实时聚合酶链式反应系统（GeneXpert）结核分枝杆菌（mycobacterium tuberculosis,MTB）/利福平（rifampin,RIF）检测对肺结核的诊断效能。方法非随机选取镇江市第三人民医院于2022年2月—2024年2月收治的100例疑似肺结核患者为研究对象，均采取全血γ-干扰素释放试验检测、痰GeneXpert MTB/RIF检测，以固体培养结果作为金标准，分析单一及联合检测的诊断效能。结果100例疑似肺结核患者经临床诊断确诊为肺结核35例，检出率为35.00%（35/100）。联合检测的灵敏度为97.14%（34/35），高于γ-干扰素释放试验的74.29%（26/35）和GeneXpert MTB/RIF的77.14%（27/35），差异有统计学意义(χ2=7.644，P<0.05）。联合与单一检测的特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度比较，差异无统计学意义（P均>0.05）。结论在肺结核的临床诊断中，全血γ-干扰素释放试验检测、GeneXpert MTB/RIF检测均有着良好的应用优势，两种检测方式联合诊断能够进一步提高诊断效能。

　　[关键词]γ-干扰素释放试验；GeneXpert结核分枝杆菌/利福平；肺结核；诊断效能

　　结核分枝杆菌在侵入到人体后对肺脏造成严重损害，可诱发肺结核[1-2]。相关调查显示，截止至2017年，全球新发结核病患者约1 000万人，分布较为广泛，其中合并HIV感染人数占比约9%[3-4]。结核病有着较高的发病率，且因其具有传染性，早发现、早干预对结核病防控尤为重要[5]。全自动医用实时聚合酶链式反应系统（GeneXpert）结核分枝杆菌（mycobacterium tuberculosis,MTB）/利福平（ri⁃fampin,RIF）是一种新型检测方法，其可将样本前处理、DNA自动提取、实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-PCR）进行有机结合，能够对样本进行精确判断，明确其中有无MTB，同时还能够对RIF耐药情况作出准确判断[6]。γ-干扰素释放试验以细胞免疫为基础，根据临床研究发现，该检测方法应用于MTB感染诊断中优势明显，对提升诊断准确性有着积极作用[7]。本研究旨在分析全血γ-干扰素释放试验联合GeneXpert MTB/RIF检测对肺结核的诊断效能，现报道如下。

　　1资料与方法

　　1.1一般资料

　　非随机选取镇江市第三人民医院于2022年2月—2024年2月收治的100例疑似肺结核患者为研究对象，其中男56例，女44例；年龄17~85岁，平均（52.31±7.30）岁。本研究经镇江市第三人民医院伦理委员会审批[科（2024）伦审第（07）号-01）]。

　　1.2纳入与排除标准

　　纳入标准：知情同意并自愿签署知情同意书；临床基础资料完整。

　　排除标准：1个月内服用可对免疫功能产生影响的药物者；合并其他免疫系统疾病者；重要脏器功能不全者。

　　1.3方法

　　所有患者均在空腹状态下用无菌肝素锂抗凝管采集新鲜全血，采集量为4 mL以上，采集完毕后于室温下进行保存，8 h内进行检测。同时留取痰液标本进行GeneXpert MTB/RIF检测。

　　以固体培养结果作为金标准。按照《结核病诊断细菌学检验规程》[8]展开罗氏固体培养法，对痰标准进行处理和固体培养，将采集到的痰液标本接种至罗氏培养基，将其放置在37℃环境中孵育，每周观察结果，若孵育8周后未长出菌落，则表明培养阴性。

　　γ-干扰素释放试验：设置3个反应管，检测管编号记作样品T号，阳性对照组则记作P号，另外的阴性对照管位N号。将刺激剂和1 mL全血加入反应管后进行孵育，时间控制在23 h左右；严格按照说明书执行相关操作。对相对发光强度（relative light unit,RLU）进行检测，计算血γ-干扰素水平，根据试剂说明书进行阴性、阳性结果的判断。判断标准：阴性对照管（N）≥0.5 IU/mL，（T-N）/（P-N）≥0.85为阳性，反之则判定为阴性；N<0.5 IU/mL，（T-N）/（P-N）≥0.60为阳性，反之则判定为阴性。

　　GeneXpert MTB/RIF检测：采集1 mL痰液存放至无菌管中，并加入2 mL处理液，拧紧后将其放置在涡旋振荡器中（参数设置：2 500 r/min，10 s），间隔10 min再次振荡10 s，确保样本能够完全液化。在液化后吸取样本，将其置于检测试剂盒中，上机检测，仪器自动判断结果。

　　1.4观察指标

　　比较不同检测方法的诊断结果及诊断效能（灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度）。根据两者检测结果进行联合检验的阳性判断，若其中一项为阳性，则判断为联合检测结果阳性。

　　1.5统计方法

　　使用SPSS 21.0统计学软件分析数据，计数资料（诊断结果、诊断效能）以例数（n）和率（%）表示，不同检测方式比较行配对χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2结果

　　2.1不同检测方式检测结果比较

　　固体培养结果显示，35例确诊为肺结核，检出率为35.00%（35/100）。联合检测的检出率高于GeneXpert MTB/RIF和γ-干扰素释放试验，见表1。

　　2.1不同检测方式诊断效能比较

　　联合检测的灵敏度高于GeneXpert MTB/RIF和γ-干扰素释放试验单一检测，差异有统计学意义（P<0.05）；联合与单一检测的特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度比较，差异无统计学意义（P均>0.05），见表2。

　　3讨论

　　在肺结核的临床治疗中，通过早期快速准确诊断，能够有效促进预后改善，对结核病传染防控有着重要意义。目前，在结核病的诊断中，结核分枝杆菌培养是最为有效的方法，但是结核杆菌的培养并非短时间内能够完成，而且其操作较为复杂，固体、液体培养时间存在明显差异，前者通常在4~12周，后者所需时间则相对较短，但是获取时间仍旧超过2周。目前在结核病中，最为多见的菌阴结核，而血清学诊断结核病存在着较大的局限性，受到抗原纯度和特异性等因素的影响，导致其诊断准确性不高[9-10]。

　　GeneXpert MTB/RIF不仅可对结核杆菌感染进行有效检测，同时也能够对利福平耐药情况进行准确检测[11-12]。这项技术涵盖标本处理、DNA提取和基因实时扩增、荧光检测，与传统检测比较，其操作便捷性更优，且气溶胶污染的风险较低，能够最大限度地避免实验操收人员受到结核杆菌感染[13]。γ-干扰素释放试验中，T淋巴细胞与结核分枝杆菌相遇会产生抗原刺激作用，γ-干扰素得以释放，故通过其水平检测，能够对机体内有无活动性结核感染、结核潜伏感染或者既往感染进行判断[14-15]。

　　Xpert MTB/RIF检测肺结核在2 h内即可检出是否存在结核分枝杆菌DNA及是否对利福平耐药，检测获取结果较为快速[16]。刘刚等[17]研究中，对艾滋病/肺结核患者采取γ-干扰素释放试验、GeneXpert MTB/RIF检测，灵敏度分别为88.66%、84.54%，均低于联合检测的94.85%。本研究中，γ-干扰素释放试验、GeneXpert MTB/RIF检测灵敏度分别为77.14%、74.29%，均低于联合检测97.14%（P均<0.05）。在其余诊断效能方面，单一检测方法与联合检测进行对比，差异无统计学意义（P均>0.05），可能与本研究纳入的样本量不足有关。Xpert MTB/RIF和γ-干扰素释放试验联合检测具有较高的灵敏度、特异度，能够弥补两者的不足，可为肺结核的诊断提供更准确的诊断依据[18-19]。根据相关研究发现，在耐利福平结核杆菌中，同时对异烟肼耐药的占比在90.00%左右，因此在结核杆菌的耐药性诊断中，通过对利福平耐药情况的判断，对多重耐药结核分期杆菌的判断也有着一定应用价值[20]。

　　综上所述，在肺结核的临床诊断中，γ-干扰素释放试验、GeneXpert MTB/RIF检测联合能够进一步提升诊断灵敏度。

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