摘要：目的探究长链非编码RNA TUG1和UCA1在结肠癌组织中的表达及临床意义。方法选取2018年5月—2020年5月收治的80例结肠癌患者为研究对象，利用原位杂交与qRT-PCR法检测TUG1和UCA1的表达，对表达情况和患者病理特征及预后进行研究。结果UCA1和TUG1在结直肠癌组织表达过程中与性别、年龄以及病理情况关系较小（P>0.05），和患者肿瘤大小、是否存在淋巴结转移、疾病的分化情况以及分期情况高度相关（P<0.05）。UCA1和TUG1高表达患者肿瘤更大，淋巴结存在转移情况，分化程度较高且TNM分期以Ⅰ/Ⅱ为主；80例患者进行随访36个月，中位生存时间33.75个月，死亡人数16例，术后总生存率80.00%（64/80）；Kaplan-Meier生存分析显示UCA1和TUG1高表达死亡12例，生存38例，生存率76.00%（38/50）；UCA1和TUG1低表达死亡4例，生存26例，生存率86.66%（26/30）。结论直肠癌组织中lncRNA TUG1和UCA1高表达与低表达对患者疾病预后有一定影响。

　　关键词：结肠癌；长链非编码RNA；TUG1；UCA1；表达情况

　　0引言

　　当前结肠癌已经成为临床中发生率较高的恶性肿瘤，发病率以及病死率均较高，严重影响人们身体健康[1-2]。随着对疾病的深入研究，发现长链非编码RNA（lncRNA）在恶性肿瘤中起到重要作用[3]。尿路上皮癌相关基因1（UCA1）和牛磺酸上调基因1（TUG1）作为两种lncRNA，其异常表达往往与肿瘤增殖、转移存在高度相关性[4-5]。目前临床中关于结肠癌组织TUG1和UCA1研究相对较少。基于此，回顾性分析80例结肠癌患者资料，对lncRNA TUG1和UCA1表达意义进行研究，具体内容如下。

　　1资料与方法

      1.1一般资料

　　回顾2018年5月—2020年5月本院收治的80例结肠癌患者为研究对象，其中，男47例，女33例。依据国际抗癌联盟（UICC）中对恶性肿瘤TNM分期进行疾病分期。I/Ⅱ期、Ⅲ/Ⅳ期患者数量分别为60例、20例；病理类型：腺癌/黏液性腺癌/其他患者数量分别为57例、17例、6例，有38例患者存在淋巴结转移，有42例患者未发生淋巴结转移。所有患者手术结束后均每两个月进行一次随访，共计随访时间36个月。

　　纳入标准：手术病历真实；肿瘤被完全切除；临床资料完整。排除标准：合并其他恶性肿瘤；存在严重代谢性疾病；视听能力障碍；存在严重的脏器器质性损伤；研究期间参与其他医学项目。

　　1.2方法

　　1.2.1原位杂交分析

　　借助临床常规技术制备肿瘤组织芯片，制备过程中利用脱蜡技术实施处理。完成处理后，与37℃的蛋白酶k进行充分接触，实施消化、漂洗、脱水等操作。在55℃的环境中实施预杂交处理，控制时间在0.5h即可。进行1∶100的探针杂交液稀释处理，放置在37℃的环境中超过24h，实施洗脱玻片，向其中添加DAB，而后对其进行封存，时间在0.5h，进行二抗，时间在一小时而后洗涤。继续加入DAB，在遮光的状态下进行10min的孵育，完成该项操作后，利用显微镜进行观察，向其中加入苏木素维持20s的复染，返蓝操作，利用乙醇进行脱水，同时采用二甲苯进行处理而后实施封片，封片过程中采用中性树脂。借助半定量分方式对其阳性进行评估，无着色0分，浅黄棕色1分，棕黄色2分，棕褐色3分，细胞染色对应的评分见表1。

　　1.2.2提取、处理、合成（RNA、DNA酶I和cDNA）

　　结合RNA提取试剂，针对组织内部的总RNA进行提取，为确保提取的全面性，需要借助琼脂糖凝胶电泳方式进行评估，确保RNA提取的完整性，并且针对其浓度实施有效检测。以DNA酶组实现DNA酶I处理，确保RNA制备过程中不含有DNA。在实际操作过程中，务必严格遵循试剂及相关仪器设备的使用指导书进行操作，以确保实验的准确性和安全性。

　　1.2.3 qRT-PCR检测

　　利用qRT-PCR方式对UCA1和TUG1具体的表达情况进行有效评估。设置内部对照，对照物所以基因扩增引物为主，观察实验过程中的仪器关于PCR的反应。具体的循环数据。95℃10min预变性，95℃变性15s，lncRNA UCA1和TUG1于61℃、GUSB基因于60℃退火，75℃延伸15s，共40个循环。

　　1.3观察指标

　　观察UCA1和TUG1表达与结肠癌临床病理参数，并对UCA1和TUG1在结肠癌中表达水平差异的生存期进行分析。

　　1.4统计学分析

　　采用SPS S25.0进行统计学分析：多组间比较采用单因素方差分析；χ2检验分析技术资料；Kaplan-Meier法绘制生存曲线；P<0.05认为差异具有统计学意义。

　　2结果

　　2.1 UCA1和TUG1表达与结肠癌临床病理参数

　　UCA1和TUG1在结直肠癌组织表达过程中与性别情况/年龄情况以及病理情况关系较小（P>0.05），和患者肿瘤大小是否存在淋巴结转移，疾病的分化情况以及分期情况存在高度相关（P<0.05）。UCA1和TUG1高表达患者肿瘤更大，淋巴结存在转移情况，分化程度较高且TNM分期以Ⅰ/Ⅱ为主，见表2。

　　2.2 UCA1和TUG1表达结肠癌中表达水平差异的生存期分析

　　80例患者进行随访36个月，中位生存时间33.75个月，死亡人数16例，术后总生存率80.00%（64/80）；Kaplan-Meier生存分析显示UCA1和TUG1高表达死亡12例，生存38例，生存率76.00%（38/50）；UCA1和TUG1低表达死亡4例，生存26例，生存率86.66%（26/30）。

　　3讨论

　　结肠癌作为恶性肿瘤，在临床中发生率较高，患者疾病预后较差，如果不能及时对患者采取有效的救治，患者死亡率较高[6]。手术尽管能够使患者病情得到改善，但是术后生存率受到多种因素影响，需要加强关于结肠癌术后预后的相关研究。恶性肿瘤发生过程中往往与lncRNA存在高度相关性。该物质能够实现基因调控、表观遗传调控、转录等[7]。

　　UCA1是一种lncRNA，通常在非小细胞肺癌，卵巢癌以及膀胱癌中具有高表达特点，这说明UCA1参与了肿瘤的发展[8]。TUG是另一种lncRNA，该物质在人体中表达较为广泛，能够实现细胞增殖促进，而且该指标的表达越高能够促进肿瘤细胞发生迁移，进而诱导细胞出现凋亡情况[9]。此次研究显示，结肠癌病理特征和UCA1和TUG1表达存在相关性。与肿瘤大小、淋巴结转移、分化程度、TNM分期相关。这一结果说明UCA1和TUG1上调能够促进肿瘤细胞生长、转移、分化[10]。而且UCA1和TUG1高表达患者生存率较低。分析原因，UCA1和TUG1过表达能够实现PI3K-AKT途径或AKT途径被激活，使肿瘤细胞不断进行生长，随着肿瘤细胞增长，对周围健康组织进行浸润，浸润到一定程度后，导致肿瘤出现转移[11-12]。同时指标的高表达还能够起到miR-145/ZEB1信号通路调控，同样能够对肿瘤细胞进行增殖。此次研究过程中存在不足之处，纳入样本数量相对较少，研究数据仅对UCA1和TUG1同步高表达、低表达进行研究，未进行分开讨论，在今后需要加强关于这方面的内容研究，确保研究结果的科学性。

　　综上所述，结肠癌组织中长链非编码RNA TUG1和UCA1表达情况与患者疾病预后存在高度相关性，针对TUG1和UCA1表达情况研究对后续患者靶向治疗以及病情监测有重要辅助作用。

　参考文献

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　　[2]金益峰,周勇,王厚明,等.lncRNA TUG1在结直肠癌组织和细胞中的表达及其对癌细胞增殖、侵袭能力的影响[J].现代肿瘤医学,2023,31(12):2270-2274.

　　[3]陈俊,周赤忠,张玲,等.长链非编码RNA TUG1调控miR-137参与局灶性脑缺血大鼠神经损伤的作用机制[J].中国比较医学杂志,2022,32(2):38-45.

　　[4]张明菊,魏运兰,李建建,等.长链非编码RNA TUG1调控miR-137参与局灶性脑缺血大鼠神经损伤的作用机制[J].卒中与神经疾病,2021,28(5):506-512.

　　[5]Guanlin W,Weidong W,Pengfei X,et al.W nt signalling pathway in bladder cancer[J].Cellular Signalling,2021,79(15):302-308.

　　[6]张小敏,邢莹,毛少秀.IncRNA-UCA1、lncRNA-GAS5在卵巢癌组织中的表达及与临床病理特征及预后的关系研究[J].临床和实验医学杂志,2021,20(22):2424-2427.

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　　[9]邹金艳,蔡莎莎,叶丽君,等.长链非编码RNA UCA1与胃癌的关系[J].浙江实用医学,2021,26(1):14-16.

　　[10]陆小琴,牛司强,毛素芳.长链非编码RNA UCA1通过靶向调控miR-613进而调控乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭[J].中国老年学杂志,2021,41(12):2608-2613.

　　[11]吴冠瑾,刘琛,秦树巧,等.长链非编码RNA TUG1参与氧糖剥夺所致Neuro-2a细胞凋亡的作用研究[J].卒中与神经疾病,2021,28(1):7-13.

　　[12]伍燕平,王蒙,张平平,等.miR-1306-5p在AML患者骨髓组织单个核细胞中的表达及对HL60细胞增殖凋亡和迁移侵袭调控作用观察[J].山东医药,2023,63(24):12-16.