[摘要]目的探讨血清Klotho蛋白、血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ,AngⅡ)与糖尿病肾病病情进展的相关性，旨在为临床控制糖尿病肾病提供新的靶点。方法选取2018年5月—2019年10月无锡人民医院确诊为糖尿病肾病的104例患者和同期体检的56名健康志愿者为研究对象。其中糖尿病肾病患者依其疾病严重程度分为3组，健康志愿者设为对照组。比较4组血清Klotho蛋白、AngⅡ表达情况；应用Pearson分析法分析血清Klotho蛋白、AngⅡ与糖尿病肾病病情进程的相关性。结果糖尿病肾病各组血清Klotho蛋白水平下降，低于健康对照组，AngⅡ水平升高，高于健康对照组，差异有统计学意义（P均<0.05）。Pearson相关分析结果显示，血清Klotho蛋白与糖尿病肾病病情进展呈负相关（r=-0.611，P<0.05），AngⅡ表达与糖尿病肾病病情进展呈正相关（r=0.529，P<0.05）。结论血清Klotho蛋白、AngⅡ与糖尿病肾病病情进展密切相关，糖尿病患者可定期监测血清Klotho蛋白、AngⅡ水平。

　　[关键词]糖尿病肾病,病情进展,血清Klotho蛋白,血管紧张素

　　Correlation between Serum Klotho Protein,AngⅡand Progression of Type 2 Diabetic Nephropathy

　　TANG Chunxia,WANG Wei

　　Department of Special Needs,Wuxi People's Hospital,Wuxi,Jiangsu Province,214023 China

　　[Abstract]Objective To explore the correlation between serum Klotho protein,angiotensinⅡ(AngⅡ)and the pro⁃gression of diabetic nephropathy,aiming to provide new targets for clinical control of diabetic nephropathy.Methods A total of 104 patients diagnosed with diabetic nephropathy in Wuxi People's Hospital from May 2018 to October 2019 and 56 healthy volunteers who underwent physical examination during the same period were selected as the study objects,The patients with diabetic nephropathy were divided into 3 groups accroding to their condition,and the volunteers were set as the control group.The expressions of serum Klotho protein and AngⅡwere compared between the 4 groups.The correlation between serum Klotho protein,AngⅡand the progression of diabetic nephropathy was analyzed by Pearson analysis.Results Serum Klotho protein level in each group of diabetic nephropathy was de⁃creased,lower than that in healthy control group,and AngⅡlevel was increased,higher than that in healthy control group,the differences were statistically significant(all P<0.05).Pearson correlation analysis showed that serum Klotho protein was negatively correlated with the progression of diabetic nephropathy(r=-0.611,P<0.05),and AngⅡexpres⁃sion was positively correlated with the progression of diabetic nephropathy(r=0.529,P<0.05).Conclusion Serum Klotho protein and AngⅡare closely related to the progression of diabetic nephropathy,and diabetic patients can be regularly monitored for serum Klotho protein and AngⅡlevels.

　　[Key words]Diabetic nephropathy;Disease progression;Serum Klotho protein;Angiotensin

　　糖尿病肾病经过不同途径、机制对肾脏造成损害，导致肾脏发生不同的病理改变，是造成糖尿病患者死亡的主要原因[1-2]。研究显示，血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ,AngⅡ)在糖尿病肾病的发病过程中具有关键意义[3]。血清Klotho蛋白主要在肾小管上皮细胞中表达，肾脏损伤早期，血清Klotho蛋白水平较低，可作为早期肾损伤的标志物[4]。目前关于糖尿病肾病病情进展程度与血清Klotho蛋白及AngⅡ的相关性研究较少。鉴于此，本研究选取2018年5月—2019年10月无锡人民医院确诊为糖尿病肾病的104例患者和同期56名健康志愿者为研究对象，分析血清Klotho蛋白及AngⅡ表达情况，以及上述指标与糖尿病肾病病情进展之间的关系，旨在为糖尿病肾病的治疗及预防提供新的靶点，控制疾病进展。现报道如下。

　　1资料与方法

　　1.1一般资料

　　选取本院收治的104例2型糖尿病肾病患者和56例健康志愿者为研究对象。糖尿病肾病患者(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组）中男73例，女31例；年龄43~79岁，平均（55.02±6.85）岁。健康志愿者（对照组）中女21例，男35例；年龄25~80岁，平均（45.113±7.95）岁。糖尿病肾病组与对照组一般资料比较，差异无统计学意义（P均>0.05），具有可比性。且研究通过本院医学伦理委员会审核。

　　1.2纳入与排除标准

　　纳入标准：①符合2型糖尿病肾病的诊断标准[5]；②病历资料齐全；③患者、家属均知情同意，并签署知情同意书。

　　排除标准：①非糖尿病所致肾脏损害者；②伴随其他内分泌疾病者，如肾上腺、甲状腺、脑垂体等；③处于哺乳期或妊娠期的女性；④伴结核、肿瘤等患者；⑤处于应激状态者，如低血糖或高渗昏迷、创伤、手术等。

　　1.3方法

　　根据HE染色、PAS染色、银染及Masson等光学显微镜下的染色，再结合电镜结果进行糖尿病肾病病理分期，并按病理分期分为Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组，其中Ⅱ期(Ⅱ组，出现系膜扩张，>25%所见系膜区）36例，Ⅲ期(Ⅲ组，出现Kimmelstiel-Wilson结节）38例，Ⅳ期(Ⅳ组，严重肾小球硬化，即>50%肾小球硬化）30例。采用酶联免疫吸附法（Enzyme-Linked Immuno⁃sorbent Assay,ELISA）检测血清Klotho蛋白水平，放射免疫法检测AngⅡ水平，所有试剂盒均购自北京北方生物技术研究所，操作按照试剂盒使用说明书进行。

　　1.4观察指标

　　对比不同受试者血清Klotho蛋白、AngⅡ表达情况，采用Pearson相关性检验分析糖尿病肾病病情进程与血清Klotho蛋白、AngⅡ之间的相关性。

　　1.5统计方法

　　应用SPSS 20.0统计学软件处理数据，血清Klotho蛋白、AngⅡ表达水平为计量资料，符合正态分布，以(±s)表示，多组间比较采用单因素方差分析检验，P<0.05为差异有统计学意义；采用Pearson分析法进行相关性分析。

　　2结果

　　2.1各组血清Klotho蛋白、AngⅡ表达水平比较

　　糖尿病肾病各组血清Klotho蛋白水平较对照组明显下降，糖尿病肾病Ⅳ组低于糖尿病肾病Ⅲ期组和糖尿病肾病Ⅱ组，糖尿病肾病Ⅲ期组低于糖尿病肾病Ⅱ组，差异有统计学意义（P均<0.05）。糖尿病肾病各组AngⅡ表达水平较健康对照组升高，糖尿病肾病Ⅳ期组高于糖尿病肾病Ⅲ期组和糖尿病肾病Ⅱ组，糖尿病肾病Ⅲ组高于糖尿病肾病Ⅱ组，差异有统计学意义（P均<0.05）。见表1。

　　2.2血清Klotho蛋白、AngⅡ表达与糖尿病肾病病情进展的相关性分析

　　结果显示，血清Klotho蛋白水平与糖尿病肾病病情进展呈负相关，血清AngⅡ表达与糖尿病肾病病情进展呈正相关（P均<0.05）。见表2。

　　3讨论

　　糖尿病肾病是糖尿病的严重并发症之一，目前对于其发病机制尚不完全清楚，治疗上只能减慢其进展，不能阻止或逆转病情发生[6]。临床上如能寻找到新的诊疗靶点，及时诊断并治疗，可为控制病情进展以及临床治疗争取更多时间。糖尿病肾病的发病机制较为复杂，但已有研究表明被激活的炎症因子及氧化应激介质引发的肾脏炎症反应可导致肾小球硬化、肾小管萎缩及肾间质持续进展性纤维化，上述过程与糖尿病肾病的发展有紧密相关性。

　　本研究结果显示，与对照组相比，糖尿病肾病各组血清Klotho蛋白下降（P<0.05），随着糖尿病肾病病情进展，血清Klotho蛋白水平呈下降趋势，Pearson分析显示Klotho蛋白水平与病情进展呈负相关。表明血清Klotho蛋白与糖尿病肾病患者病情进展密切相关。在田浩等[7]研究中，慢性肾脏病患者中血清Klotho蛋白水平明显降低，Ⅰ~Ⅱ期患者血清Klotho蛋白水平为（4.51±0.57）ng/mL，Ⅲ~Ⅳ期为（3.43±0.64）ng/mL，Ⅴ期为（2.95±0.47）ng/mL，且血清Klotho蛋白水平与患者分期相关（P<0.05）。Guo J等[8]通过体外实验观察到晚期糖基化终末产物可增强氧化应激，从而降低小管上皮细胞Klotho的表达；随着病情进展，导致分解血清Klotho蛋白的肿瘤坏死因子Q转换酶表达增加，血清Klotho蛋白水平下降。分析原因，血清Klotho蛋白对肾脏具有护作用，机制为：①增强抗凋亡蛋白的稳定性，间接抑制氧化应激反应；②抑制细胞内相关传导信号，增高抗氧化酶水平；③拮抗肾素-血管紧张素系统作用等[9-10]。在糖尿病肾病进展过程中，血清Klotho蛋白水平不断下降。本研究结果显示，对比对照组，糖尿病肾病各组AngⅡ表达水平较明显升高，随着病情进展，AngⅡ呈上升趋势，血清AngⅡ与病情进展呈正相关（r=0.529，P<0.05），这与Hui⁃min S等[11]研究结果一致。分析原因为，糖尿病患者长时间处于高血糖状态，AngⅡ高代谢使得细胞因子系统激活，糖尿病肾病进展，机制可能为：①AngⅡ激活肾小管、肾小球中的AT1受体，血管阻力增加，肾血流量减少，刺激系膜、促进细胞外基质产生，促进疾病进展[12-14]；②AngⅡ导致内皮功能受损，促进产生活性氧，活化NF-κB，肾小球滤过屏障受损[15]。本研究结果表明，血清Klotho蛋白、AngⅡ与糖尿病肾病患者病情进展密不可分。但本研究并未分析各指标水平与糖尿病肾病预后之间的关系，且纳入的研究样本较少。鉴于此，研究结果的可信度还需在未来开展更多的相关性研究加以佐证，旨在为临床治疗争取更多时间提供新的靶点依据。

　　综上所述，血清Klotho蛋白、AngⅡ与糖尿病肾病患者病情进展密切相关，临床糖尿病患者可定期检测血清Klotho蛋白、AngⅡ水平，及时预防并治疗，旨在控制病情进展，为临床治疗争取更多时间，促进患者良性预后。

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