摘要：为探究畜牧业生产活动肉鸡屠宰加工对空气环境的影响，试验从某大型肉鸡屠宰场选取了3类不同的功能区作为采样 点，通过分离培养菌种鉴定，运用BIOLOG微生物全自动分析仪，首次对各采样点分离培养的细菌、真菌进行种属鉴定。 所分离的培养物中共鉴定出细菌菌属47种，其中革兰氏阳性菌比例远高于革兰氏阴性菌，优势菌属依次为微球菌属、葡萄 球菌属、芽孢杆菌属、棒杆菌属和假单胞菌属，其中20% ～ 30%为微球菌属;鉴定出真菌菌属共12属，优势真菌依次为枝 孢属、链格孢属、毛霉属、曲霉属和青霉属。该肉鸡屠宰场屠宰活动对空气环境未产生不利影响。随着畜牧业生产活动的 快速发展以及屠宰加工厂布局设计规划，畜禽屠宰加工引起的环境污染问题应引起更多的关注。

　　关键词： 屠宰,监测,分析,空气微生物,生物气溶胶

　　0 引言

　　近年，我国畜禽养殖业飞速发展，养殖规模不断扩 大，仅禽类的规模化饲养，饲养肉鸡的出栏量已占全国家禽出栏量的40%以上[1] 。这些发展引起了一系列全球 性的环境、社会和公共健康问题[2-3] 。在集约化畜禽养 殖及屠宰生产过程中，由于动物相对密集，致使环境空气质量不断下降，导致环境空气污染[4] 。同时，使空气 中混杂有害气体，和大量的微生物，这些有害物质和致 病性微生物侵入动物机体和人类的呼吸系统，传播病原 微生物，而且造成畜禽和人类抵抗力下降，免疫力降 低，动物及人类的易感性升高，进而引起一系列条件性 致病病原体的感染，直接影响动物健康和生产性能发 挥，影响养殖业的发展，带来的具大的经济损失，甚至 引发一系列的公共卫生事件[5] 。尽管近年我国采取了多 项举措，但畜禽屠宰加工对空气环境影响仍是重点控制 环节[5] 。孙晓文等[6-7]从江苏省某生鸡屠宰场40份环境擦 拭样品中分离到单核细胞增生李斯特菌15份，分离率为 37.5%。王佩佩等[8]监测到某家禽屠宰场的环境及屠宰工 器具表面的优势菌属假单胞菌属。林本夫等[9]报道广州 市某禽屠宰场空气、地面及土壤环境样品中沙门氏菌阳 性检出率为18.18%。在此背景下，试验以某大型肉鸡屠 宰加工场为研究对象，研究肉鸡屠宰场外环境空气微生 物群落结构及分布特征，旨在探索屠宰加工对空气环境 质量影响，并对畜牧业生产活动中畜禽屠宰加工对空气 环境质量影响提供一定的理论数据。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料

　　1.1.1 采样对象

　　研究选取年屠宰肉鸡3 000万只的大型肉鸡屠宰场3 个不同的功能区：毛鸡屠宰区、人员及产品出入区、绿 化区，分别选择3个定位观测点，于2022年10月—2023 年9月取样。毛鸡屠宰区，选取毛鸡待宰棚( SSC) ，人 员及产品出入区选择人员及产品通道(EPV)，绿化区 选择厂区的绿化带(GB)，见表1.

　　1.1.2 主要仪器

　　Andersen生物粒子取样器( FA-1 );全自动细菌鉴 定分析仪(型号为VITEK2.生物梅里埃法国股份有限 公司生产)。

　　1.2 方法

　　1.2.1 采样方法

　　利用Andersen生物粒子取样器定点采集样品。该采 样器结构类似于人体呼吸道[10] 。利用物理学上的惯性撞 击原理进行设计。采样器共有6级，在每一级中共有孔 数为400个孔，从第1 ～ 6级，各级的孔径逐渐缩小，而 空气流速逐渐增大。通过以上作用将空气中的微生物粒 子按照粒径不同截获在不同级别的培养皿中。在试验设计的3个取样观测点进行取样，取样频率为在1年中， 每个月取样1次， 取样时天气晴朗， 每次取样时， 连续 取3 d， 在每天的取样中又分为3个时段， 分别为9:00 、 13:00和17:00.取样周期为1年。采样时，采样的高度应 处于人体的呼吸带，距离地面1.5 m处，采样时空气流量 设为28.3 L/min，空气微生物取样器的各级筛孔至采样 面的距离为2 mm ，采样时间设置为3 min。采样时所用 的玻璃平皿为9 cm 的，玻璃平皿通过灭菌后，在无菌的 条件下加入20 mL的培养基。

　　1.2.2 培养及鉴定

　　细菌采样介质用营养琼脂培养基，采集的细菌样品 在37 ℃培养箱内培养48 h，然后分别在各级采样皿上对 细菌菌落进行记数。真菌采样介质用沙氏培养基(葡萄 搪40 g、蛋白胨10 g、琼脂20 g、蒸馏水1 000 mL)。采 集的真菌样品在25 ℃培养箱内培养72 h，分别在各级采 样皿上进行菌落记数。然后利用BIOLOG微生物全自动 鉴定系统进行鉴定。

　　1.2.3 计算方法

　　空气微生物浓度：由于通过空气微生物取样器采样 过程中，各级筛孔的微生物粒子在过量时将会出现在同 一筛孔的同点个多个粒子叠加的情况，所以在不同级数上采集到的菌落总数应通过式1进行校正。

　　式中， Pr为校正后的菌落数， N为采样器各级采样 孔数， r为实际的菌落数。

　　最后根据校正后各级空气带菌粒子的数量，计算空 气真菌的浓度和各级带菌粒子的百分比。具体计算方法 如式2.

　　式2中， C为空气真菌浓度， T为六级总菌落数， t为 采样时间： F为空气流量。

　　各级带菌粒子百分比见式3.

　　式3中， P为各级带菌粒子百分比; T为六级总菌落 数： n为各级菌落数。

　　1.3 统计方法

　　本研究利用Microsoft Excel2007对数据分析和图表 绘制。

　　2 结果与分析

　　2.1 不同取样观测点空气细菌群落结构与物种组成

　　在肉鸡屠宰场检测到的空气细菌种类中革兰氏阳性 菌(G+ )的比例要远高于革兰氏阴性菌(G- )所占的比例，其中革兰氏阳性菌占80% ～ 85%，在革兰氏阳性菌 中其中的革兰氏阳性球菌占50% ～ 55%，而革兰氏阳性 杆菌占25% ～ 35% ;革兰氏阴性菌占 15% ～ 20%。

　　监测到47属空气细菌，其中为革兰氏阳性菌31属， 占总细菌的66.0%;革兰氏阴性菌 16属，占总空气细菌 物34.0%。在所有检测到的47属空气细菌中，有五属细 菌占总细菌的百分比接近50%，称其为优势菌属。肉鸡 定点屠宰场空气微生物优势菌属为微球菌属、葡萄球菌 属、芽孢杆菌属、棒杆菌属和假单胞菌属，在这五属优 势菌属中，微球菌属占总数的20% ～ 30%，葡萄球菌属 占总数的8% ～ 17%、芽孢杆菌属占5.6% ～ 9%、棒杆菌 属占3.2% ～ 4.8%、假单胞菌属占2.5% ～ 5.0%，见表2.

　　2.2 不同取样观测点空气真菌群落结构和物种组成

　　3个不同的取样观测点共鉴定出12属空气真菌，见表3.肉鸡定点屠宰场， 3个不同的取样观测点鉴定的空 气真菌的种类相似，其中有五属空所真菌其浓度总和占 空气真菌浓度总和的90%以上，被命名为肉鸡屠宰场监 测到的空气真菌优势菌属。这五属空气真菌依次为是枝 孢属、链格孢属、毛霉属、曲霉属和青霉属，优势菌 属在肉鸡屠宰场的3个不同取样观测点及不同的取样时 间均全部都检测到。 3个观测点空气真菌的种类相似但 是，在3个不同的取样观测点，优势菌属的浓度比例各 不相同。在人员及货物通道，百分比浓度较高的优势菌 属为枝孢属、青霉属和链格孢属。在绿化区的青霉属浓 度百分比要高于毛鸡等宰棚和人员及货物通道，见表 3 。肉鸡定点屠宰场空气真菌优势菌菌属中， 最活跃的 为枝孢属。

　　3 讨论

　　3.1 不同取样观测点空气细菌群落结构与物种组成

　　在肉鸡屠宰场监测的空气细菌微生物类型，本研究 的发现与国内研究者对不同的环境的研究结果类似，均 为革兰氏阳性菌显著高于革兰氏阴性菌，而且阳性球菌 明显高于阳性杆菌。然而，在不同研究环境或不同功能 类型区，革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌的比率不同。在 研究中发现了5种优势菌，其中微球菌属所占的比例为 20% ～ 30%。这可能是由于优势菌属中含有一些胡萝卜色素和一些细菌孢子，这些因子可以耐受日光照射[11] 。 国外不同研究针对不同的功能性环境区域取样研究发 现，优势菌属也为微球菌属和葡萄球菌属[12-15]。在国内 的一些对不同城市的研究报道中，微球菌属、葡萄球菌 属和芽孢杆菌属均主细菌类型的主导地位[16] 。然而，在 Shaffer B等[17]对4个不同类型的功能区进行研究结果发 现，占主导地位的为芽孢杆菌，微球菌属的浓度值很 低， 葡萄球菌属没有监测到。这种结果可能与所选取的 研究区域有关，在不同的功能区，由于地理环境，当地的 条件以及区域的功能类型不同，优势菌属的种类也不同。

　　3.2 不同取样观测点空气真菌群落结构和物种组成

　　在肉鸡屠宰场空气真菌共鉴定到12种。在3个取样 观测点共确定五属空气真菌依次为为枝孢属、毛霉属、 链格抱属、青霉属和曲霉属。其中枝孢菌属浓度占总浓 度的35%以上。这与国内外学者在不同功能环境中的研 究结果一致[18]。在方治国对不同城市室内外真菌群落及 影响因素研究进展的综述中，总结了部分国家和地区空 气真菌和优势菌属，在美国鉴定的真菌为青霉属、链格 孢属、拟青霉属、曲霉属和镰孢属，在芬兰出现的真菌 为枝孢属、青霉属、曲霉属、酵母菌和无孢菌，在埃及 出现的真菌有枝孢属、链格孢属、酵母菌和单孢霉属。 在米兰、利雅得、都灵、墨西哥、以色列均以枝孢菌属 和青霉属为优势菌属。而在国内的报道中，在北京、上 海、武汉、成都的研究中发现[16-19] ，枝孢属、链格孢属 和青霉属均处于主导地位，而在重庆和合肥以青霉属、 毛霉属和镰格孢属为主，从这些调查中发现，不同环境 中空气真菌的分布具有明显的地域性。空气真菌种属的 不同与地理状况、气候条件、取样方法、取样时间均有密切的关系。

　　4 结论

　　在肉鸡屠宰场外挂鸡区、人员和货物通道及厂区绿 化带3个采样点，共鉴定出47个细菌菌属，其优势菌属 为微球菌属、葡萄球菌属、芽孢杆菌属和假单胞菌属， 在优势菌属中，微球菌属又占总数的20% ～ 30% ;共鉴 定出真菌菌属共12属，其优势菌属为枝孢属、毛霉属、 链格孢属、青霉属和曲霉属。

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