摘要：该研究旨在探索并确立一种可靠的乙酸诱导仔猪溃疡性结肠炎模型。试验选取了18头健康的杜洛克仔猪作为研究对象，将其随机分配至对照组、TNBS组以及乙酸组，每组仔猪麻醉后直肠灌注不同试剂，包括生理盐水、不同浓度的三硝基苯磺酸50%乙醇溶液以及不同浓度的乙酸溶液，旨在诱发不同程度的结肠炎病变。观察期内详细记录仔猪的临床表现与粪便特征，并在灌注3～7 d后进行宰杀，收集结肠组织进行结肠黏膜损伤评估。研究结果指出，直肠灌注10%乙酸能够成功建立仔猪溃疡性结肠炎模型。该研究以期为深入理解溃疡性结肠炎的发病机制、药物筛选及治疗策略提供一个稳定且有效的动物模型平台。

　　关键词：溃疡性结肠炎；乙醇；乙酸

　　0引言

　　仔猪溃疡性结肠炎（PUC）是一种严重影响养猪业经济效益的消化道疾病，特征为结肠黏膜的慢性炎症与溃疡形成，常伴有腹泻、生长迟缓甚至死亡，给养殖业带来重大的经济损失。该病不仅损害动物健康，还可能影响食品安全，因而在兽医学和畜牧生产中占有重要地位。尽管已有关于PUC的研究报道，但其确切的发病机制尚未完全明了，有效的预防与治疗方法也相对匮乏。近年，随着分子生物学和免疫学技术的飞速发展，建立稳定可靠的动物模型成为深入研究PUC病理机制、评估新型治疗手段及疫苗效果的关键步骤。本文旨在以杜洛克仔猪为例，建立仔猪溃疡性结肠炎模型，以期填补PUC模型研究的空白。

　　1材料与方法

　　1.1主要试剂

　　戊巴比妥钠：纯度≥98%，购自北京偶合科技有限公司；三硝基苯磺酸（TNBS）：50%乙醇水溶液（w/v），购自上海源叶生物科技有限公司；乙酸：纯度≥99.5%，购自国药集团；无菌生理盐水：浓度为0.9%，购自上海复申生物科技有限公司。

　　1.2试验动物与方法

　　1.2.1试验动物及分组

　　研究选取18头体重4.5～5.5 kg的杜洛克仔猪，严格控制其在（36±2）日龄，以减少个体差异对试验结果的影响。这些仔猪被随机分为对照组、TNBS处理组和乙酸组3组，每组处理方法，见表1。试验期间，所有仔猪均饲喂神农集团的SNP-4仔猪配合饲料，并进行为期5 d的预饲期，让仔猪适应环境和饮食，减少非试验因素的干扰。

　　1.2.2模型制作方法

　　选取健康仔猪作为研究对象，所有仔猪在灌注前36 h实施禁食、不禁水预处理，减少胃肠道内容物对模型的影响。按30 mg/kg静脉注射戊巴比妥钠，麻醉15 min后开始灌肠操作。灌肠前，通过肛管检查是否存在粪块阻塞，一旦发现则使用肥皂水彻底清洗仔猪肠道，直至排出液清澈。灌肠时，将仔猪置于左侧卧位，小心地将特制肛管旋转插入其肛门深处约25 cm。根据试验设计，分别向各组仔猪灌注不同物质，包括TNBS、乙酸和生理盐水。灌注完成后，将仔猪短暂倒立1 min，以促进灌注液更好地覆盖结肠黏膜，随后将其放回栏内并保持静卧状态，密切监控仔猪的行为反应及生理变化。

　　1.3样品采集

　　试验仔猪在经过3~7 d处理后，首先采用50 mg/kg剂量的戊巴比妥钠进行静脉麻醉，以确保动物在无痛状态下接受后续处理。麻醉效果显现约15 min后实施屠宰操作，迅速摘除仔猪的整段结肠。为减少组织污染与保持样本的原始状态，沿肠系膜边缘小心剪开肠腔，使用生理盐水彻底冲洗内部残留的内容物。随后，将清洗干净的结肠平展并固定，肉眼观察记录肠壁的形态学变化，如充血、水肿、溃疡形成等宏观特征。

　　1.4观察指标

　　1.4.1仔猪状态与粪便情况

　　灌肠后每天观察仔猪的精神状态、采食量、粪便性状及是否便血等情况。

　　（1）精神状态。采用行为评分系统，从活跃（5分）至昏迷（1分）进行评分，细致评估仔猪活力水平。

　　（2）采食量。精确称重、记录每头仔猪日摄入饲料量，与模型建立前基线值比较，计算摄入量的百分比变化。

　　（3）粪便性状。依据布里斯托粪便形态量表（表2），从1型（硬块，便秘样）至7型（水样，无固体部分）评估仔猪粪便质地，每日记录并分析趋势。1型粪便通常与便秘相关，可能表示肠道内容物通过速度缓慢，水分被过度吸收；2型粪便虽然形状接近正常，但表面的凹凸表明肠道内容物通过时可能存在一定的困难；3型粪便表明肠道内容物通过较为顺畅，但表面裂痕暗示存在轻微的腹泻倾向；4型是正常、健康的粪便类型，表明肠道功能良好；5型粪便与腹泻相关，可能是肠道炎症或感染的表现；6型水样便明确表示腹泻，可能是严重的肠道炎症或病原体感染的迹象；7型是最严重的水样粪便，与急性腹泻有关，是严重肠道疾病的一个标志。

　　（4）便血情况。通过肉眼观察及粪便潜血试验，以+、++、+++、++++四级标准记录便血程度。具体分级如下：+：粪便表面有少量血迹，但未渗透到整个粪便中；++：粪便表面有明显血迹，部分血迹渗透到粪便内部；+++：粪便表面及内部均有明显血迹，血迹分布广泛；++++：粪便完全呈鲜红色，血迹分布均匀。

　　1.4.2结肠黏膜损伤评分

　　结肠黏膜损伤评分（CMDI）是评估模型成功建立及病情严重程度的关键指标。该评分方式为肉眼观察。结肠黏膜损伤评分标准，见表3。

　　每项指标的评分范围为0～3，分值越高表示该项指标的损伤程度越严重。根据各项指标的评分，可以计算出总的CMDI评分，从而评估模型的建立情况和病情的严重程度。

　　1.5数据处理

　　数据处理严格遵循统计学原则，确保结果的准确性和可靠性。所有试验收集的数据首先经过仔细核对，随后运用SPSS统计软件进行细致分析。以“平均值±标准差”形式展示各项定量数据，以此概括每个试验组内的集中趋势与变异程度。肉眼观察评分采用独立样本t检验评估不同处理组间（如模型组与对照组）的差异是否符合正态分布，进而判断模型是否建立成功。

　　2结果与分析

　　2.1仔猪临床表现与粪便情况

　　结果显示，灌注生理盐水的对照组中所有仔猪维持良好的精神状态，采食活动未受干扰，粪便形态正常，无稀便或便血现象。在TNBS处理组中，分别给予25 mg/kg与50 mg/kg剂量，尽管仔猪精神状态保持正常，但采食量有轻微下降，并伴有短期稀便出现，这些症状在治疗后的第2天便恢复。乙酸处理组则展现了更为显著的变化。接受5%乙酸灌注的仔猪精神与采食行为与对照组相似，仅出现短暂的稀便随后迅速恢复正常，表明这一浓度的乙酸刺激相对温和。当乙酸浓度提升至10%时，仔猪表现出明显的临床异常，包括精神萎靡、行动减少、背部微弓姿势，伴随显著的食欲减退。更关键的是，该组仔猪出现了稀便与含有脓血的粪便，并检测到肠黏膜脱落物。尽管血便现象在第2天停止，但稀便状态持续至第3天才完全恢复。这表明10%的乙酸灌注对仔猪肠道造成了较为严重的损伤，引发了典型的溃疡性结肠炎症状。

　　2.2结肠黏膜损伤程度评估

　　进一步进行结肠黏膜损伤程度评估，以证实临床观察结果是否可靠。表4数据显示了各组别仔猪在宰杀后，通过肉眼观察得到的结肠黏膜损伤程度评分，这些评分是基于结肠外观的改变（如粘连、水肿、溃疡）来确定的。后7 d，仔猪的结肠黏膜没有出现肉眼可见的损伤，评分为0。这说明无菌生理盐水作为对照处理对结肠黏膜没有造成损伤，确保了试验设计的合理性和对照组的有效性。TNBS组数据显示，在直肠灌注含25 mg/kg体重TNBS后7 d，仔猪的结肠黏膜损伤评分为0.68±1.16，而当剂量增加到50 mg/kg体重时损伤评分保持相对不变。这一结果表示，一定范围内TNBS剂量的增加并未显著增强结肠黏膜的损伤程度，可能是因为仔猪自身修复机制的作用。乙酸组的数据则呈现不同的趋势。直肠灌注5%乙酸7 d后，仔猪的结肠黏膜损伤评分为0.68±0.59，与TNBS组相似，但当浓度增加到10%并在3 d后进行观察时，损伤评分显著升高至5.11±1.01，这表明高浓度乙酸能够在较短时间内引起严重的结肠黏膜损伤。

　　当同样使用10%乙酸，但在7 d后进行观察时，损伤评分下降，这是由于仔猪结肠黏膜在一定程度上的自我修复能力所致。这一结果提示，仔猪对TNBS的反应不敏感，无法有效诱导出期望的抗原性炎症反应。相比之下，乙酸诱导展现出更高的适用性和敏感性。针对猪肠道特有的耐受力和代谢速率，本研究优化了乙酸的浓度与施用时间，选用10%乙酸10 mL进行1 min直肠灌注，此方案在仔猪中产生了显著的炎症反应，包括粪便性状改变、结肠形态异常表征。这些发现验证了直肠灌注10%乙酸后能够成功建立仔猪溃疡性结肠炎模型。

　　3结束语

　　本研究旨在通过乙酸诱导的方法建立仔猪溃疡性结肠炎模型，以期为溃疡性结肠炎研究提供可靠的动物模型。试验中选取了18头健康仔猪并将其随机分为对照组、TNBS组和乙酸组进行不同的试剂处理。研究发现直肠灌注10%乙酸诱导的方法能够成功诱发仔猪的结肠炎症状。希望未来的研究能够在此基础上进一步优化模型，为临床治疗提供更多的参考依据。

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