摘要：建立了一种超声提取－液相色谱法，用于测定土壤和沉积物中的双酚A，经过优化提取条件，以正己烷/二氯甲烷为萃取剂，对样品进行萃取。提取液浓缩后，采用液相色谱法进行分析。实验结果表明：双酚A在0.00～1000μg/L范围内线性关系良好，相关系数可达到0.999。当取样量为10.0 g时，根据该方法测得的方法检出限为0.04 mg/kg。有证标准样品准确度实验结果表明，测得的双酚A的相对误差范围为-19％～18％，相对标准偏差范围为6.4%~12.6％。实际样品准确度实验结果表明，土壤双酚A的加标回收范围为75.5％～117％，相对标准偏差范围为3.6%~14％。沉积物双酚A的加标回收范围为71.1％～116％，相对标准偏差范围为4.2％～19％，该方法适用于土壤和沉积物中双酚A的测定。

　　关键词：超声提取；液相色谱法；双酚A；土壤；沉积物

　　0引言

　　双酚A（BPA）作为一种典型的环境内分泌干扰物，广泛存在于塑料制品和工业材料中，并通过废水排放、垃圾填埋等多种途径进入环境[1]。近年来，我国多个地区土壤和沉积物中均检测到双酚A污染，其残留可能通过食物链富集对生物体和人类健康构成潜在威胁[2]。目前，我国尚未发布适用于土壤和沉积物中双酚A测定的国家标准或行业标准，通过定量分析对其可能的环境风险评估有待于进一步研究。

　　相关研究资料表明，超高效液相色谱－串联质谱法（UPLC-MS/MS）可实现土壤中双酚A及其13种结构类似物的同步测定[3]，从而显著提高检测效率和准确性。此外，基于免疫分析的胶体金层析法具有快速、便携的优点，被应用于现场检测[4]。现行相似分析方法中，生态环境部发布的《水质9种烷基酚类化合物和双酚A的测定固相萃取/高效液相色谱法》（HJ 1192—2021）[5]为液相色谱法测定双酚A奠定了理论基础，而土壤和沉积物前处理方法则多种多样，包括加压流体萃取、萃取提取、微波萃取和超声提取[6-7]等。其中，超声提取具备操作相对简单，耗时较短等优势。同时，考虑到土壤和沉积物复杂基质干扰需求，有必要对提取液固相萃取净化。因此，本文在上述资料基础上，提出一种超声提取、固相萃取净化，结合液相色谱分析土壤和沉积物中双酚A的方法，并对其适用性开展验证。

　　1实验部分

　　1.1主要仪器与试剂

　　主要仪器：Agilent 1260高效液相色谱仪（美国安捷伦，配备荧光检测器FLD）、EPAA-2300TH超声萃取仪（上海安谱）、SCIENTZ-10N冷冻干燥机（宁波新芝生物）、AutoEVA-60氮吹浓缩装置（厦门睿科）、ZORBAXEclipsePlusC18色谱柱（美国安捷伦，4.6mm×250 mm×5μm）和其他实验室常用仪器和设备。

　　主要试剂：二氯甲烷（上海安谱，色谱纯）、甲醇（上海安谱，色谱纯）、乙腈（上海安谱，色谱纯）、二氯甲烷（上海安谱，色谱纯）和其他实验室常用试剂。

　　双酚A标准储备液（甲醇中双酚A标准溶液，上海安谱，质量浓度为1 000 mg/L）。标准使用液（取适量上述双酚A储备液于容量瓶，用乙腈稀释至刻度，混匀备用，于4℃下、密封、避光保存）。

　　1.2样品采集

　　在某工业园区周边按照HJ/T 166—2014《土壤环境监测技术规范》的相关要求采集土壤样品，在某接近干涸河道按照GB 17378.3—2007《海洋监测规范第3部分：样品采集、贮存与运输》的相关要求采集沉积物样品。样品用洁净的具塞磨口棕色玻璃瓶（大于60 mL）中保存。运输过程中应密封、避光、4℃以下冷藏。

　　1.3提取剂选择

　　超声波提取时，提取剂可选用二氯甲烷、正已烷、二氯甲烷-丙酮混合溶剂或正已烷-丙酮混合溶剂等，结合HJ 703—2014《土壤和沉积物酚类化合物的测定气相色谱法》中推荐的提取剂以及净化过程固相萃取溶剂转化需要，本文选择正己烷/二氯甲烷作为萃取剂进行验证。

　　1.4试样制备

　　土壤或沉积物样品经冷冻干燥脱水后，采用四分法均化混匀。准确称取10 g（精确至0.1 g）样品于锥形瓶中，用体积比1∶1的正己烷/二氯甲烷混合溶液30 mL，常温最大功率超声提取3 min，重复3次。通过过滤分离出有机相，并将有机相转移到氮吹管中。残渣加入1 mL乙腈溶解，经0.2μm微孔滤膜过滤后合并提取液。

　　1.5净化与浓缩

　　依次用10 mL正已烷10 mL二氯甲烷、10 mL甲醇和10 mL实验用水活化固相萃取柱，在活化过程中，确保固相萃取柱中填料表面不露出液面。将过滤后的样品以3 mL/min的流速通过固相萃取柱。然后，用10 mL甲醇溶液淋洗固相萃取柱，去除固相萃取柱上的杂质。用氮气吹干固相萃取柱，再以2 mL/min的流速，分别用2 mL甲醇和5 mL二氯甲烷洗脱，收集洗脱液至浓缩瓶中，经氮吹仪浓缩后进行高效液相色谱分析。

　　1.6仪器条件

　　1.6.1氮吹浓缩条件

　　浓缩水温为30℃,气压为20 kPa，氮吹针追随速度为1.0 mm/min。

　　1.6.2液相色谱条件

　　流动相：体积比为9∶1的乙腈和水。洗脱方式：等度洗脱10 min。流速为1.0 mL/min，柱温为35℃。激发波长为227 nm，发射波长313 nm。进样量为10μL，梯度洗脱程序如表1所示。

　　2数据结果与分析

　　2.1方法的线性范围、相关系数与检出限

　　取适量双酚A标准使用液，用乙腈稀释，制备标准系列，目标化合物的质量浓度分别为0、20、50、100、500、1 000μg/L。按照仪器的参考条件，由低质量浓度到高质量浓度依次进样，以目标物的保留时间定性，以标准系列溶液中目标化合物的质量浓度ρ为横坐标，对应的峰面积A为纵坐标，建立校准曲线。在本文的仪器条件下，双酚A标准溶液色谱图如图1所示。

　　按照上述标准曲线系列上机分析，绘制标准曲线，显示质量浓度在0～1 000μg/L范围内呈良好的线性关系，相关系数为0.999。将空白石英砂分别加入10.0μL质量浓度为10.0μg/mL的双酚A标准使用液（取样量为10 g时，理论加标量为0.01 mg/kg），平行分析7次，按照《环境监测分析方法标准制订技术导则》（HJ 168—2020）计算标准偏差（S），并按照公式方法检出限（MDL）=3.143S（3.143为自由度=n-1、置信度为99％时的分布取值）计算方法检出限，结果如表2所示。当取样量为10 g时，双酚A检出限为0.04 mg/kg，说明所采用的方式适应性良好，检出限达到了预期分析目的。

　　2.2方法的准确度

　　2.2.1有证标准样品的测定

　　将双酚A有证标准物质分别配制为0.20、0.50、1.00 mg/kg的标准样品，按照本文所述方法平行测定6次，计算相对标准偏差以及相对误差，结果如表3所示。由表3得出，双酚A的相对误差范围为-19%~18％，相对标准偏差范围为6.4％～12.6％。

　　2.2.2实际样品测定

　　将采集的土壤和沉积物按照本文所述方法进行分析，测定结果显示，未检出目标物。因此，对土壤和沉积物样品分别进行0.20、0.50、1.00 mg/kg的加标回收测定，平行测定6次，计算相对标准偏差以及加标回收率，统计结果如表4所示。由表4可知，土壤双酚A的加标回收范围为75.5％～117％，相对标准偏差范围为3.6％～14％。沉积物双酚A的加标回收范围为71.1％～116％，相对标准偏差范围为4.2％～19％。实际样品本底未检出。

　　3结论

　　1）本文建立了一种土壤和沉积物中双酚A的超声提取－液相色谱法，实验结果表明，双酚A在0~1 000μg/L范围内线性关系良好，相关系数可达到0.999。当取样量为10.0 g时，采用该方法测得的方法检出限为0.04 mg/kg。

　　2）有证标准样品准确度实验结果表明，测得的双酚A的相对误差范围为-19％～18％，相对标准偏差范围为6.4％～12.6％。实际样品准确度实验结果表明，土壤双酚A的加标回收范围为75.5％～117%,相对标准偏差范围为3.6％～14％。沉积物双酚A的加标回收范围为71.1％～116％，相对标准偏差范围为4.2％～19％。

　　3）超声提取法在土壤和沉积物前处理中具有操作相对简单、耗时较短的优势，结合液相色谱分析双酚A的成熟技术，表明该方法对土壤和沉积物中双酚A的测定适用性良好。

参考文献

　　[1]刘延湘，刘琼玉，陈芳，等.双酚A在土壤中的吸附性能[J].江汉大学学报（自然科学版），2009，37（1）：41-44.

　　[2]田家英，谭睿婕，柳玉英，等.双酚A在沉积物－水相中的分配行为研究[J].环境工程技术学报，2023，13（3）：210-215.

　　[3]吕志江，徐逸文，何艳，等.土壤中双酚A及其结构类似物的同步测定方法研究[J].分析化学，2021，49（5）：789-796.

　　[4]赵肃清.土壤中双酚A的胶体金层析测定方法建立与评价研究[D].广州：广东工业大学，2010.

　　[5]生态环境部.水质9种烷基酚类化合物和双酚A的测定固相萃取/高效液相色谱法：HJ 1192-2021[S].北京：中国环境出版社，2022.

　　[6]环境保护部.土壤和沉积物酚类化合物的测定气相色谱法：HJ 703—2014[S].北京：中国环境出版社，2014.

　　[7]环境保护部.土壤和沉积物有机物的提取超声波萃取法：HJ 911—2017[S].北京：中国环境出版社，2022.