[摘要]目的分析在艾滋病病毒抗体检测中，应用酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA）和胶体金法的检验效果。方法选取2018年6月—2023年6月海安市疾病预防控制中心复检人类免疫缺陷病毒抗体检测的90份样本作为研究对象，均应用胶体金法及ELISA法检测。比较两种检测方式的诊断效能。结果胶体金法检测灵敏度93.33%、特异度86.67%、准确度92.22%；ELISA法检测灵敏度100.00%、特异度93.33%、准确率98.89%。ELISA法检测灵敏度及准确度均优于胶体金法，差异有统计学意义(χ2=5.172、4.709，P均＜0.05）。结论在艾滋病诊断中，应用ELISA及胶体金法均有较高的诊断效能，ELISA法检测灵敏度及准确度均优于胶体金法。

　　[关键词]艾滋病；酶联免疫法；胶体金法；抗体检测；诊断效能

　　Analysis of the Value of Colloidal Gold Method and Enzyme-linked Immu⁃nosorbent Application for HIV Antibody Detection

　　CUI Yifeng

　　Department of Microbiology Test,Haian Center for Disease Control and Prevention,Nantong,Jiangsu Province,

　　226600 China

　　[Abstract]Objective To analyze the test effect of application using enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)and colloidal gold method in antibody of human immunodeficiency virus(HIV)detection.Methods From June 2018 to June 2023,90 samples of HIV antibody retested by the Center for Disease Control and Prevention of Haian City were selected as the research objects,all of which were detected by colloidal gold method and ELISA method.The diagnos⁃tic efficiency of the two detection methods was compared.Results The sensitivity,specifity and accuracy of colloidal gold method were 93.33%,86.67%and 92.22%,respectively.The sensitivity,specifity and accuracy of the ELISA method were 100.00%,93.33%and 98.89%,respectively.The detection sensitivity and accuracy of ELISA method were better than those of colloidal gold method,and the differences were statistically significant(χ2=5.172,4.709,both P＜0.05).Conclusion In the diagnosis of acquired immune deficiency sgndrome,the application of ELISA and colloidal gold method both have high diagnostic efficacy,and the detection sensitivity and accuracy of ELISA method are better than colloidal gold method.

　　[Key words]AIDS;ELISA;Colloidal gold;Antibody detection;Diagnostic efficacy

　　艾滋病为临床中常见的传染性疾病之一，人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus,HIV）在进入人体后会攻击机体免疫系统，进而引发安全问题。HIV通过攻击CD4+T淋巴细胞，来逐步击溃机体的免疫屏障，破坏机体免疫力[1]。当前临床上针对该病尚无特异性治疗方法，为避免疾病进一步进展，需强化对疑似感染HIV人员的预防与检测。艾滋病的潜伏时间较长，一般可达到8~9年[2]。在这期间病毒可能会传播给其他人，诱发更大的伤害。因此，有必要对疑似艾滋病患者早期筛查。酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked Immunosorbent As⁃say,ELISA）和胶体金法均适用于对艾滋病抗体的早期筛查。但两类检测方式原理不同，故检测结果可能存在差异。本研究选取2018年6月—2023年6月海安市疾病预防控制中心复检HIV抗体检测的90份样本作为研究对象，验证胶体金法及ELISA法检测与蛋白印迹法（Western Blot,WB）检测（金标准）的结果差异，现报道如下。

　　1资料与方法

　　1.1一般资料

　　选取本中心复检HIV抗体检测的90份样本作为研究对象，均应用胶体金法及酶联免疫吸附法检测。

　　1.2纳入与排除标准

　　纳入标准：受检人员均同时进行了胶体金法及ELISA两种检测方式；均对本研究知情，并签署同意书。

　　排除标准：伴发精神障碍疾患者；伴发免疫系统疾病者；抵触本研究者。

　　1.3方法

　　ELISA检测：所有受试者均是采集外周静脉血，进行离心处理。离心速率为3 500 r/min。离心时间为10 min。取血清适量，放置在室温条件下待检。取ELISA试剂盒检测。检测时分别设置阴性、阳性、空白对照组。①加入样本：向试剂盒中加入样品100μl；②样本的第一次孵育：在37℃条件下孵育60 min，然后洗板拍干；③样本的第二次孵育：再加入100μl酶孵育30 min，再进行洗板拍干操作；④向样本中加入显色剂：分别向其中加入显色剂A、B各50μl，混匀后封板；⑤加入终止液：将其放置在37℃环境下，避光保存30 min，向其中加入终止液。检测波长450 nm（参考波长620 nm）。

　　胶体金法检测：取血液样本，将其放置于室温下。向其中垂直加入待测样本（25μL左右）到试剂卡加样孔中。在15~20 min内判读结果。最终检测结果显示检测区与对照区均有红色条带为阳性。

　　1.4观察指标

　　①以WB检测作为金标准，分析ELISA法、胶体金法的阳性检出率、阴性检出率。

　　②对比ELISA法、胶体金法的诊断效能，包括灵敏度、特异度、准确率。灵敏度=真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数）×100%；特异度=真阴性例数/（假阳性例数+真阴性例数）×100%；准确率=（真阳性例数+真阴性例数）/总例数×100%。

　　1.5统计方法

　　采用SPSS 26.0统计学软件进行数据分析，检出结果、诊断效能为计数资料，以例数（n）和率（%）表示，行χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

　　2结果

　　2.1 ELISA法、胶体金法的诊断结果

　　胶体金法检出阳性72例，阴性18例；ELISA法检出阳性76例，阴性14例。见表1。

　　2.2 ELISA法、胶体金法的诊断效能比较

　　胶体金法检测灵敏度93.33%、特异度86.67%、准确率92.22%；ELISA法检测灵敏度100.00%、特异度93.33%、准确率98.89%。ELISA法检测灵敏度及准确率均优于胶体金法，差异有统计学意义（P均＜0.05）。见表2。

　　3讨论

　　诱发艾滋病的病因与患者感染HIV病毒有关。患者在疾病感染前期症状与常人无异。在未接受检查时，病症很难被发现，在高危性行为下很容易传播给他人。患者在发病后，机体免疫力逐步下降[3]。机体免疫力降低，使得患者较易感染其他疾病，在疾病终末期，患者多是因感染性疾病而死亡。现阶段艾滋病已经被列入乙类法定传染病中。虽然临床上针对该病治疗推出了多种药物，但尚无特异性治疗药物。通过早期确诊疾病，可控制患者病情进展。ELISA法、胶体金法及WB检测法均可对该病早期检测，其中WB检测法为金标准检测方式[4]。本研究显示，胶体金法检测灵敏度93.33%、特异度86.67%、准确率92.22%；ELISA法检测灵敏度100.00%、特异度93.33%、准确率98.89%。ELISA法检测的灵敏度及准确率均优于胶体金法（P均＜0.05），说明两类检测方式均对艾滋病有着较高的检出率。究其原因，胶体金法主要是氯金酸在还原剂的作用下逐步形成颗粒，并在静电作用下形成稳定状态的一种检测模式。胶体金属于免疫标记物之一，能够标记艾滋病抗体，利于临床诊断开展。这类检测方式不仅诊断灵敏性较高，同时患者在检测过程中，无需应用特殊的设备和试剂，操作简单，只需利用试剂盒及检测仪器就可完成检查，一般实验室采用直接观察判断结果[5]。这类检测方式应用的不足之处在于检测时间短，可能会出现产物之间反应不充分的情况发生，导致漏诊和误诊。

　　本研究应用的另一类检测方式ELISA法在临床中应用时间较长，检测原理是让抗体结合到固相载体表面。最终保证抗原的活性，借助酶标记物进行检测的一种方式。若是抗体多，反应程度剧烈，则反应孔显示颜色会更深[6]。通过酶标分析仪检测，对抗体量进行细化分析。ELISA检测方式酶催化效果可观，应用检测准确率高。从整体上看，两类检测方式诊断准确度均＞90%，但仍存在一定误诊及漏诊。为进一步使检测结果提升，可将两类检

　　测方式联合。ELISA检测方式相较于胶体金测定方式的优势在于：操作时借助洗涤方式，促进其他成分与免疫复合物分离，受检物质量占比增加，利于检测准确度提升[7]；可将其作为定性检测的一种方式；检测原理可保持高酶活性及免疫活性，其是利用抗体固相载体表面结合原理开展的，在操作时，操作手法及试剂对检测结果产生的影响小[8]。

　　付福玲[9]对90例疑似艾滋病患者血液中的HIV水平进行了检测，结果显示，WB检出50例，艾滋病确诊率55.56％；胶体金法检出46例，确诊率为51.11％，ELISA法检出47例，确诊率为52.22％。以WB为标准，胶体金法符合率92.00％，ELISA法符合率94.00％。可见，ELISA法和胶体金法在HIV抗体检测方面一致性佳。这一结果说明在艾滋病抗体检测中，应用ELISA法检测，能够最大限度明确患者疾病的一般状况。

　　本研究结果显示，ELISA法检测血清用量较胶体金法高，检测用时较胶体金法更长（P＜0.05）。分析原因，主要是由于ELISA法检测对仪器设备要求高，检测过程中需要在显色反应后，借助酶标仪检测溶液吸光光度值，这是其检测时间长的原因之一[9]。而胶体金检测方式则较为简化，但是操作不当，很可能出现误检情况[10]。这一特性使得胶体金检测法适用于艾滋病的大面积筛查。为保证检测结果的科学性，提示在胶体金检测时，需预防室温过低，需在20~28℃完成各项操作，所获结果相对稳定[11]；ELISA检测时，严格按照操作参数检测，检测时样本稳定，保证其中气泡被剔除[12]。

　　综上所述，在HIV诊断中，应用ELISA及胶体金法均有较高的诊断效能，但胶体金检测血清用量较少、实验条件及操作要求不高等，利于快速检测早期筛查艾滋病人，适合基层不具备条件申请筛查实验室的检测点应用。

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