【摘要】目的：分析胃腺癌中微小RNA-550a-3p（miR-550a-3p）和酪氨酰-DNA磷酸二酯酶1（TDP1）mRNA的表达水平及临床意义。方法：选取2020年1月至2022年10月在该院行手术治疗的54例胃腺癌患者进行前瞻性研究，留取术后胃腺癌组织和距肿物边缘>5 cm的正常胃黏膜组织，应用实时荧光定量PCR法检测胃腺癌组织和正常胃黏膜组织中miR-550-5p和TDP1 mRNA水平，比较胃腺癌组织与正常胃黏膜组织、不同病理特征胃腺癌组织miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平，分析miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平与胃腺癌发病的相关性。结果：胃腺癌组织miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平均高于正常胃黏膜组织，差异有统计学意义（P＜0.05）；不同性别、年龄、淋巴结转移、分化程度、脉管侵犯的胃腺癌组织miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；肿瘤最大径≥5cm、浸润深度浆膜及以下胃腺癌组织的miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平均高于肿瘤最大径<5 cm、浸润深度未及浆膜的胃腺癌组织，差异有统计学意义（P＜0.05）；Pearson相关性分析结果显示，miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平与胃腺癌发病呈正相关（r＞0，P＜0.05）。结论：miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平与胃腺癌的病灶大小和浸润程度明显相关，且与发病情况呈正相关。

　　【关键词】胃腺癌；微小RNA-550a-3p；酪氨酰-DNA磷酸二酯酶1；相关性；表达水平

　　The expression levels and clinical significance of miR-550a-3p and TDP1 mRNA in gastric adenocarcinoma

　　YANG Qinglin1,XIAN Ying2,XUAN Fengjiao1,ZHANG Rui1,ZHANG Lin3*(The Third Affiliated Hospital of Jinzhou Medical University,1.General Surgery,

　　2.Department of Gynecology,3.Department of Oncology,Jinzhou 121000 Liaoning,China)

　　【Abstract】Objective:To analyze the expression levels and clinical significance of microRNA-550a-3p(miR-550a-3p)and tyrosyl-DNA phosphodiesterase 1(TDP1)in gastric adenocarcinoma.Methods:A prospective study was conducted on 54 patients with gastric adenocarcinoma who underwent surgical treatment in this hospital from January 2020 to October 2022.The postoperative gastric adenocarcinoma tissues and normal gastric mucosa tissues>5 cm from the edge of the tumor were collected.The levels of miR-550-5p and TDP1 mRNA in the gastric adenocarcinoma tissues and the normal gastric mucosa tissues were detected by real-timefluorescence quantitative PCR.The levels of miR-550a-3p and TDP1 mRNA in the gastric adenocarcinoma tissues and the normal gastric mucosa tissues as well as the gastric adenocarcinoma tissues with different pathological characteristics were compared.The correlations among the miR-550a-3p and TDP1 mRNA levels and gastric adenocarcinoma were analyzed.Results:The levels of miR-550a-3p and TDP1 mRNA in the gastric adenocarcinoma tissue were significantly higher than those in the normal gastric mucosal tissue,and the differences were statistically significant(P＜0.05).There were no statistically significant differences in the miR-550a-3p and TDP1 mRNA levels among the gastric adenocarcinoma tissues of the patients with different genders,ages,lymph node metastasis,degree of differentiation,and vascular involvement(P＞0.05).There were statistically significant differences in the miR-550a-3p and TDP1 mRNA levels between the gastric adenocarcinoma tissues with a maximum tumor diameter of≥5 cm and a depth of invasion of the serosa or below(P＜0.05).Pearson correlation analysis showed the miR-550a-3p and TDP1 mRNA levels were positively correlated with gastric adenocarcinoma(r＞0,P＜0.05).Conclusions:The levels of miR-550a-3p and TDP1 mRNA are positively correlated with gastric adenocarcinoma.

　　【Keywords】Gastric adenocarcinoma;MicroRNA-550a-3p;Tyrosyl-DNA phosphodiesterase 1;Correlation;Expression level

　　分子病理技术的发展为研究胃腺癌机制提供了重要支持，多种基因和遗传因素异常是胃腺癌形成的基础[1]。微小RNA（miRNAs）是一种非编码小RNA，可影响mRNA翻译，参与多种肿瘤发生发展过程[2-3]。酪氨酰-DNA磷酸二酯酶1（TDP1）能调控下游基因的生物学过程。已知肺腺癌组织TDP1呈高表达的特征，对肿瘤形成具有驱动作用[4]。微小RNA-550a-3p（miR-550a-3p）在胃腺癌中具有异常表达的生物学特征。本文分析胃腺癌中miR-550a-3p和TDP1 mRNA的表达水平及临床意义。

　　1资料与方法

　　1.1一般资料选取2020年1月至2022年10月本院行手术治疗的54例胃腺癌患者进行前瞻性研究。纳入标准：符合根治性手术适应证；术前均行胃镜检查和活检确诊为胃腺癌；临床资料完整。排除标准：伴有消化系统先天发育异常；同时性或异时性双原发癌；复发性胃癌。患者及其家属对本研究内容了解并自愿签署知情同意书，且研究经本院伦理委员会审批通过。其中男30例，女24例；年龄35~84岁，平均（62.5±9.7）岁；伴有淋巴结转移19例。

　　1.2方法留取术后肿瘤组织和距肿物边缘＞5 cm的正常胃黏膜组织的新鲜标本（-80℃冻存）。采用实时荧光定量PCR检测miR-550a-3p和TDP1 mRNA的表达水平。取新鲜冻存组织，研碎后提取总RNA（TriZol）并进行验证后，合成cDNA模板。引物由上海召远公司合成，miR-550a-3p引物上游：5'-ACTGTCAACTGGTGTAACCGTGGATCG-3'，下游：5'-ACACTCCAGCAACTGCGTGTGGGTAGC-3'；TDP1 mRNA引物上游：5'-GCACTGGTGAATTCGT TGAGTCAACATC-3'，下游：5'-CAGACACTCCAC GTTTCGTGTGGGCTT-3'。执行实时PCR，共31个循环。记录Ct值，结果以2-ΔΔCt法表示。

　　1.3观察指标（1）比较胃腺癌组织与正常胃黏膜组织中miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平，并分析miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平与胃腺癌发病的相关性。（2）比较不同病理特征胃腺癌组织miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平。

　　1.4统计学方法应用SPSS 21.0软件进行统计学分析，计量资料以（±s）表示，采用t检验，计数资料以率（%）表示，采用χ2检验，采用Pearson相关性分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

　　2结果

　　2.1胃腺癌组织与正常胃黏膜组织miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平比较胃腺癌组织miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平均高于正常胃黏膜组织，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

　　2.2 miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平与胃腺癌发病的相关性Pearson相关性分析结果显示，miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平与胃腺癌发病均呈正相关（r=4.251、3.987，P=0.000、0.000）。

　　2.3不同病理特征胃腺癌组织miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平比较不同性别、年龄、淋巴结转移、分化程度、脉管侵犯情况患者胃腺癌组织的miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；肿瘤最大径≥5 cm、浸润深度浆膜及以下胃腺癌组织的miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平均高于肿瘤最大径＜5 cm、浸润深度未及浆膜的胃腺癌组织，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

　　3讨论

　　胃腺癌起源于胃黏膜腺上皮细胞，病变形成涉及复杂的基因调控网络[5-6]。TDP1是近年发现的酶类，能水解3’-磷酸酪氨酰键，与内部连接处理和加工DNA拓扑异构酶1有关，具有修复不可逆DNA共价复合物的作用[7-8]。TDP1有17个外显子，2个5’非编码外显子和15个编码外显子，具有多种上游调控因子，包括miRNAs和多种长链非编码RNA等，诱导胃癌细胞凋亡，其作用方式与抑制线粒体DNA损伤修复及功能维持、激活线粒体内源性凋亡途径有关[9]。miR-550a-3p的靶基因可能参与肿瘤细胞的正性代谢过程和蛋白质的结合，通过调控上皮增殖和细胞迁移，提高细胞的增殖能力，显著抑制细胞的凋亡，促进肿瘤的进展[10-11]。

　　本研究结果显示，胃腺癌组织miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平均高于正常胃黏膜组织，Pearson相关性分析结果显示，miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平与胃腺癌发病均呈正相关。提示miR-550a-3p和TDP1 mRNA高表达在胃腺癌的形成和进展中具有重要作用。分析原因为miR-550a-3p和TDP1在胃腺癌组织高表达是肿瘤发生的始动因素，其具体作用方式可能与上游、下游多种复杂调控通路有关[12-13]。本研究结果同时显示，肿瘤最大径≥5 cm、浸润深度浆膜及以下胃腺癌组织的miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平高于肿瘤最大径＜5 cm、浸润深度未及浆膜的胃腺癌组织。分析原因为高水平miR-550a-3p和TDP1可促进肿瘤生长，肿瘤呈失控性增殖的状态，异型细胞数量增多，且向周围组织侵袭性生长，呈“蟹足”样，并与其他细胞的异质型黏附性升高，侵犯并破坏周围组织和器官，使其呈侵袭和迁移的活跃状态[14-15]。本研究结果还显示，不同性别、年龄、淋巴结转移、分化程度、脉管侵犯情况患者的胃腺癌组织miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平比较，差异无统计学意义。提示miR-550a-3p和TDP1 mRNA与细胞迁移、分化及幼稚程度可能无关。

　　综上所述，miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平与胃腺癌的病灶大小和浸润程度明显相关，且与发病情况呈正相关。

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