【摘要】 目的：探讨结核分枝杆菌抗体(TB-Ab)、γ- 干扰素释放试验(IGRA)、GeneXpert 技术联合检测在肺结核合并糖尿病 诊断中的效能。方法： 回顾性分析 2019 年 1 月至 2022 年 12 月于惠安县医院就诊的 200 例疑似肺结核合并糖尿病患者的临床资料，均行 TB-Ab、IGRA、GeneXpert 技术检测，以痰培养结果为金标准，分析三者单项及联合检测诊断肺结核的效能。结果： 痰培养结果显示，200 例疑似肺结核合并糖尿病患者中， 177 例肺结核， 占 88.50%(177/200)， 23 例非肺结核， 占 11.50%(23/200);TB-Ab 检测检出阳性 186 例， 占 93.00%(186/200);IGRA 检测检出阳性 187 例， 占 93.50%(187/200);GeneXpert 技术检出阳性 162 例， 占 81.00%(162/200); 联 合检测检出阳性 175 例， 占 87.50%(175/200);GeneXpert 技术诊断肺结核的特异度、阳性预测值均高于 TB-Ab、IGRA 单项检测， 灵 敏度低于 TB-Ab、IGRA 单项检测，差异均有统计学意义(r<0.05) ;联合检测诊断肺结核的准确度、阴性预测值均高于 TB-Ab、IGRA、 GeneXpert 技术单项检测，差异均有统计学意义( r<0.05)。结论： TB-Ab、IGRA、GeneXpert 技术联合检测诊断肺结核的效能高于三者单 项检测。

　　【关键词】 结核分枝杆菌抗体,γ- 干扰素释放试验,GeneXpert 技术,肺结核,糖尿病,诊断,效能

　　Efficacy ofTB-Ab detection,IGRA combined with GeneXpert in diagnosisof pulmonary tuberculosis complicated with diabetes mellitus

　　WANG Weibin1. WANG Jingwen2. ZHANG Chuanyi1

　　(1. Department of Infectious Diseases of Hui’an County Hospital, Quanzhou 362100 Fujian, China; 2. Department of Internal Medicine of Luoyang Town Health Center, Quanzhou 362100 Fujian, China)

　　【 Abstract】 Objective:To investigate efficacy of Mycobacterium tuberculosis antibody (TB-Ab) detection, interferon-γ release assay (IGRA) combined with GeneXpert technology in diagnosis of pulmonary tuberculosis complicated with diabetes. Methods:The clinical data of 200 patients with suspected pulmonary tuberculosis complicated with diabetes who were treated in the hospital from January 2019 to December 2022 were retrospectively analyzed. TB-Ab, IGRA and GeneXpert were detected in all patients. Using the results of sputum culture as the gold standard, the efficacy of combined detection of the three technologies in the diagnosis of pulmonary tuberculosis was analyzed. Results:The results of sputum culture showed that among the 200 patients with suspected pulmonary tuberculosis complicated with diabetes, 177 cases were diagnosed as pulmonary tuberculosis, accounting for 88.50% (177/200), and 23 were non-pulmonary tuberculosis cases, accounting for 11.50% (23/200). TB-Ab test detected 186 positive cases, accounting for 93.00% (186/200). IGRA detected 187 positive cases, accounting for 93.50% (187/200). GeneXpert technology detected 162 positive cases, accounting for 81.00% (162/200). The combined detection detected 175 positive cases, accounting for 87.50% (175/200). The specificity and the positive predictive value of GeneXpert technology in the diagnosis of pulmonary tuberculosis were higher than those of single TB-Ab detection and single IGRA detection, the sensitivity was lower than that of single TB-Ab detection and single IGRA detection, and the differences were statistically significant (r<0.05). The accuracy and the negative predictive value of the combined detection in the diagnosis of pulmonary tuberculosis were higher than those of single TB-Ab detection, single IGRA detection and single GeneXpert single detection, and the differences were statistically significant (r<0.05). Conclusions:The efficacy of combined detection of TB-Ab, IGRA and GeneXpert in the diagnosis of pulmonary tuberculosis complicated with diabetes is higher than those of three single detections.

　　【Keywords】 Mycobacterium tuberculosis antibody; Interferon-γ release assay; GeneXpert technology; Pulmonary tuberculosis; Diabetes; Diagnosis; Efficacy

　　肺结核为常见呼吸系统慢性传染病，结核分枝 杆菌定植于肺部后，仅少数患者急性发病，多数患 者进入潜伏感染状态，当机体免疫功能低下或超敏反应增强时可发展为活动性肺结核 [1] 。近年来，肺 结核合并糖尿病患者数量显著增加，相较于单纯肺 结核患者，其预后较差，临床多需结合临床表现、 实验室及影像学检查等联合诊断，过程较为复杂， 不利于肺结核的快速诊断 [2] 。GeneXpert 技术可通 过快速完成结核分枝杆菌 DNA 扩增诊断肺结核，而结核分枝杆菌抗体(TB-Ab)检测可反映机体结 核分枝杆菌感染情况，同时结核分枝杆菌感染可诱 发免疫反应， 导致 γ-干扰素(IFN-γ)水平异常， 上述指标均可用于诊断肺结核 [3-4] 。本文探讨 TB- Ab、 γ- 干扰素释放试验(IGRA )、GeneXpert 技 术联合检测在肺结核合并糖尿病诊断中的效能。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料 回顾性分析 2019 年 1 月至 2022 年 12 月惠安县医院收治的 200 例疑似肺结核合并 糖尿病患者的临床资料。纳入标准：符合糖尿病诊 断标准 [5] ;根据咳嗽、咯血、胸痛等临床表现怀疑 肺结核;临床资料完整;行结核分枝杆菌痰培养、 GeneXpert 技术、TB-Ab、IGRA 检测。排除标准： 合并免疫缺陷;合并其他器官结核;合并其他系 统炎症障碍疾病。其中男 121 例，女 79 例;年龄 19~64 岁，平均(41.05±12.57)岁。

　　1.2 方法 结核分枝杆菌痰培养：用清水或生理 盐水漱口后，指导患者正确咳出呼吸道深部痰液， 采集 5 mL 痰液，经 NALC-NaOH 处理后接种于液 体培养基，8 周后观察结核分枝杆菌菌落数量，可 见菌落生长为阳性，未见菌落生长则为阴性。

　　GeneXpert 检测：用清水或生理盐水漱口后， 指导患者正确咳出呼吸道深部痰液，采集 5 mL 痰 液，采用无菌吸管抽取约 2 mL 痰液，加入 4 mL 4% NaOH 并震荡混合均匀， 于室温静置 15 min， 无菌吸管抽取 2 mL 混合液加入 GeneXpert 检测试 剂盒，将试剂盒置于 GeneXpert 检测仪器(赛沛 GeneXpert IV-R1 型) 中进行检测， 以检出结核分 枝杆菌 DNA 为阳性，未检出为阴性。

　　TB-Ab 检测：抽取患者血液， 离心(离心半径 10 cm，离心速度 3200 r/min， 离心时间 3 min) 取 上清后，采用胶体金法检测结核分枝杆菌免疫球蛋 白(Ig)G 抗体， 以 T 区出现红色印迹为阳性;采 用酶联免疫吸附法检测结核分枝杆菌 IgM 抗体，以 OD 值≥ 0.2 为阳性。IgG 与 IgM 抗体任一结果阳 性即判定为 TB-Ab 阳性，二者均为阴性则判定为 TB-Ab 阴性。

　　IGRA 检测： 采用 T 细胞斑点试验(T-SPOT. TB)， 采集患者 5 mL 静脉血， 采用 T-SPOT.TB 试 剂盒并严格按照说明书操作，于放大镜下通过观察 测试孔上斑点数判定结果：对照孔斑点数≤ 5 个， 样本孔斑点数较对照孔多≥ 6 个，或对照孔斑点 数≥ 6 个， 样本孔斑点数为对照孔斑点数的≥ 2 倍，为阳性。联合检测：GeneXpert 技术、TB-Ab、IGRA 任 一检测结果阳性即判定为阳性。

　　1.3 观察指标 (1) 痰培养结果。(2) TB-Ab、 IGRA、GeneXpert 技术单项及联合检测诊断肺结核 的 结 果。(3)比较 TB-Ab、IGRA、GeneXpert 技 术单项及联合检测诊断肺结核的效能。

　　1.4 统计学方法 应用 SPSS 22.0 软件进行统计学分析，计量资料以( x(—) ±s )表示，采用 t 检验，计数资料以率(%)表示，采用 χ2 检验，以 P<0.05 为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 痰培养结果 200 例疑似肺结核合并糖尿病患 者中，177 例确诊肺结核， 占 88.50%(177/200)， 23 例非肺结核，占 11.50%(23/200)。

　　2.2 TB-Ab、IGRA、GeneXpert 技术单项及联合检 测诊断肺结核的结果 TB-Ab检测检出阳性186例， 占 93.00%(186/200); IGRA 检测检出阳性 187 例， 占 93.50%(187/200); GeneXpert 技术检出阳性 162 例，占 81.00%(162/200) ;联合检测检出阳 性 175 例，占 87.50%(175/200)。见表 1.

　　2.3 TB-Ab、IGRA、GeneXpert 技术单项及联合检 测诊断肺结核的效能比较 GeneXpert 技术诊断肺 结核的特异度、阳性预测值均高于 TB-Ab、IGRA 单项检测，灵敏度低于 TB-Ab、IGRA 单项检测， 差异均有统计学意义(P<0.05) ;联合检测诊断肺 结核的准确度、阴性预测值均高于 TB-Ab、IGRA、 GeneXpert 技术单项检测，差异均有统计学意义 ( P<0.05)。见表 2.

　　3 讨论

　　肺结核为常见的呼吸系统疾病，为我国发病率第二的传染性疾病。糖尿病患者因血糖水平较 高、胰岛素抵抗等原因导致机体巨噬细胞吞噬功 能与白细胞趋化功能降低，免疫力下降，相较非糖 尿病患者并发肺结核的风险高。同时肺结核会加重 糖尿病患者的病情，故需尽早明确诊断，改善患者 预后 [6]。

　　肺结核的辅助诊断方法主要包括影像和实验室 检查两大类，胸部 X 线检查可在诊断肺结核的同 时定位结核灶部位、性质及大小，但其主要通过肺 部阴影、空洞等特征影像学表现诊断肺结核，缺乏 特异性，需血液或痰液检查辅助。实验室检查中结 核菌素(PDD)试验仅能反映患者曾感染结核分枝 杆菌，且该试验受人体免疫功能影响较大，对于部 分免疫力低下患者难以检出 [7]， 因此目前主要作为 学校等地的肺结核筛查手段。痰培养为诊断肺结核 的金标准，但所需时间较长，诊断效率较低。CT 为诊断肺部感染性疾病的常用检查方法，但部分肺 结核患者 CT 表现为与普通肺炎类似的磨玻璃影及 斑片状阴影，诊断特异性低，诊断效能不佳。本研 究结果显示，GeneXpert 技术诊断肺结核的特异度、 阳性预测值均高于 TB-Ab、IGRA 单项检测。分析 原因为 TB-Ab 和 IGRA 均为免疫学检测方法， 其中 TB-Ab 通过测定机体内结核分枝杆菌 Ig 进行肺结 核检测，属于体液免疫技术，但结核分枝杆菌是胞 内感染菌，故患者免疫反应以细胞免疫为主 [8] 。而 IGRA 原理为人体内 T 细胞在感染结核分枝杆菌后 可产生免疫应答，再次遇到结核分枝杆菌后可释放 IFN-γ,但难以排除患者肺结核治愈的可能，导致 假阳性率较高，难以直接诊断活动性结核病，多用 于结核病的辅助诊断 [9] 。GeneXpert 技术采用标本 液化、去污染、DNA提取等一体化的PCR检测系统， 可有效缩短检测时间，同时操作简单安全，在大规 模筛查中优势明显，且对活菌及死菌均有较好的检 出能力，因此误诊率较低 [10] 。本研究结果同时显 示， GeneXpert 技术诊断肺结核的灵敏度低于 TB- Ab、IGRA 单项检测。分析原因可能与 GeneXpert 技术检测样本均为痰液标本，但部分患者咳出痰液较少有关。本研究结果还显示，联合检测诊断肺 结核的准确度、阴性预测值均高于 TB-Ab、IGRA、 GeneXpert 技术单项检测。这一结果与文献报道相 似 [11] 。提示 TB-Ab、IGRA、GeneXpert 技术联合检 测可弥补三者单项检测的不足，诊断效能更高。

　　综上所述，TB-Ab、IGRA、GeneXpert 技术联 合检测诊断肺结核合并糖尿病的效能高于三者单项 检测。

　参考文献

　　[1] 徐少华，黄江华，杨涛，等 . ELOVL2 和 MCP-1 基因多态性 与肺结核易感性的关联 [J]. 中华医院感染学杂志，2022 ，32 ( 20 )： 3098-3103.

　　[2] 汪胤，唐硕润 . 康复新液与薄芝糖肽联合抗结核药物治疗肺 结核合并糖尿病的疗效研究 [J]. 湖南师范大学学报(医学版)， 2022 ，19( 2 )： 77-81.

　　[3] 刘刚，卢振 . γ- 干扰素释放试验联合 GeneXpert MTB/RIF 在 艾滋病合并肺结核中的诊断价值 [J]. 中国性科学，2021 ，30 ( 12 )： 147-149.

　　[4] 张雅惠，伍小英，何刚 . 结核感染 T 细胞斑点试验、结核分 枝杆菌抗体检查在诊断肺结核患者诊断中的应用比较 [J]. 现 代诊断与治疗， 2022 ，33( 1 )： 1-4.

　　[5] 中华医学会糖尿病学分会 . 中国 2 型糖尿病防治指南(2017 年版)[J]. 中华糖尿病杂志， 2018 ，10( 1 )： 4-67.

　　[6] 聂永聪，宁夏丽，杨鹏彥，等 . 糖尿病合并肺结核的免疫学、 炎症机制及诊疗的研究进展 [J]. 海南医学，2022 ，33( 22 )： 2985-2988.

　　[7] 穆丹 . 比较 T 细胞斑点试验、痰噬菌体联合结核菌素试验对 诊断肺结核的价值 [J]. 中国卫生检验杂志，2021 ，31( 2 )： 172-174.

　　[8] 何梅芳，刘健红，陈春华，等 . 全血 γ- 干扰素释放试验与 ELISA 检测结核分枝杆菌抗体在痰菌阴性肺结核辅助诊断中 的比较应用 [J]. 诊断学理论与实践，2018 ，17( 5 )： 586- 589.

　　[9] 方世正，郭淑芳，张彩苹 . T-SPOT. TB 在具有高危因素的疑 似肺结核病例中的辅助诊断价值及影响因素分析 [J]. 临床肺 科杂志， 2022 ，27( 8 )： 1138-1142.

　　[10] 陈家洁，陈孙云 . GeneXpert MTB/RIF 检测技术在基层结核病 定点医院的应用效果评价 [J]. 临床肺科杂志， 2023.28( 2 )： 172-177.

　　[11] 林卫佳，魏艳召，苏菁，等 . 三种检测技术在矽肺合并肺结 核患者诊断中的应用价值 [J]. 工业卫生与职业病，2023.49 ( 1 )： 22-25.