摘要：为有效评估北疆地区规模化奶牛场的常见疫病的流行情况和防控效果，该研究采集北疆4个规模化养殖场共计446头奶牛的血清样本，采用液相阻断ELISA、虎红平板凝集试验和竞争ELISA等检测方法，对血清中O型口蹄疫和病毒性腹泻免疫抗体及布鲁氏菌病（简称布病）感染抗体进行检测。结果表明，牛群O型FMD的免疫抗体合格率为99.78%，奶牛病毒性腹泻免疫抗体合格率为84.53%，布病的感染抗体阳性率为0。通过本次研究，北疆规模化养殖场在口蹄疫和布鲁氏菌病的防控方面取得了良好的成效，免疫抗体水平均高于我国农业农村部规定的70%。虽然奶牛病毒性腹泻的免疫抗体合格率高于国家标准，但奶牛病毒性腹泻病在生产实际中时有发生，养殖户除加强疫苗免疫工作外也应重视养殖环境的清洗消毒工作。

　　关键词：口蹄疫；病毒性腹泻；布鲁氏菌病

　　Laboratory Investigation on the Prevalence of Major Diseases in Some Large-scale Dairy Farms in Northern Xinjiang

　　ZHOU Jiping1，WANG Tao1*，LI Zhaoxin1，JIANG Yuting1，GUO Yajun2

　　（1.Urumqi Animal Disease Control and Diagnosis Center，Urumqi Xinjiang 830063，China；

　　2.Midong District Animal Husbandry and Veterinary Station，Urumqi Xinjiang 830017，China）

　　Abstract：In order to effectively evaluate the epidemic situation and control effect of common diseases in large-scale dairy farms in northern Xinjiang，serum samples of 446 dairy cows were collected from 4 large-scale dairy farms in northern Xinjiang，the serum antibodies against foot-and-mouth disease type O and viral diarrhea and Brucellosis infection were detected by liquid-phase blocking Elisa，Tiger Red agglutination test and competitive Elisa．The results showed that the qualified rate of immune antibody to type O FMD，BVD and brucellosis was 99.78%，84.53%and 0 respectively．In this study，the prevention and control of foot-and-mouth disease and Brucellosis disease in large-scale farms in northern Xinjiang have achieved good results，and the immune antibody level is higher than 70%of that stipulated by the Ministry of Agriculture and rural areas of our country．Although the qualified rate of BVD antibody in dairy cows was higher than the national standard，the viral diarrhea of dairy cows occurred from time to time in production practice，in addition to strengthening vaccine immunization，farmers should also pay attention to the cleaning and disinfection of the farming environment.

　　Keywords：Foot and mouth disease，Viral diarrhea，Brucellosis

　　0引言

　　近年，在我国畜牧业不断发展的过程中，新疆奶牛养殖业迎来繁荣发展，养殖格局逐渐替代过去的小、散、杂的分布特点，在保证质量的前提下，奶牛存栏量与产奶量由数量型向质量性转变，呈现缓慢增长趋势[1]。北疆地区的奶牛养殖规模化也随之提高也逐渐成为全疆牛奶输出的重要地区。然而，在奶牛养殖过程中，口蹄疫、病毒性腹泻和布鲁氏菌病仍是影响奶牛健康和生产性能的重要疾病，对新疆奶牛养殖业的发展造成一定的阻碍[2-4]。为切实掌握当下北疆地区规模奶牛养殖场常发疫病的免疫情况，为今后动物疫病防控工作的开展提供科学依据，本研究从北疆4个规模奶牛场采集样品，通过实验室血清学方法检测，掌握规模化养殖场在口蹄疫、病毒性腹泻免疫情况以及布鲁氏菌病感染情况，不断提升奶牛疫病综合防控水平和应急处置能力，为促进新疆奶牛养殖业的稳定发展贡献力量。

　　1材料与方法

　　1.1材料

　　1.1.1血清样本

　　本研究采集4个规模化养殖场共计446头奶牛作为研究对象（4个规模养殖场均接种O型口蹄疫、牛病毒性腹泻疫苗），采用尾静脉采血的方法，放置室温下待血清自然析出，分离出血清后，置于4℃保存备用。

　　1.1.2检测试剂

　　口蹄疫病毒O型（FMDV-O）抗体检测试剂盒为北京金诺百泰生物技术有限公司产品、牛病毒性腹泻抗体检测试剂盒为爱德士生物科技有限公司产品、布病C-ELISA抗体检测试剂盒为青岛立见生物科技有限公司产品、虎红平板凝集抗原、标准阴性血清，标准阳性血清均为哈药集团生物疫苗有限公司产品。

　　1.1.3主要仪器

　　高速台式离心机、微量移液器（配滴头）、恒温培养箱、微量振荡器、酶标仪等。

　　1.2检测方法

　　口蹄疫O型抗体和牛病毒性腹泻抗体检测方法和结果判定均按照试剂盒使用说明书进行；布鲁氏菌病临床检测依据GB/T18646—2018《动物布鲁氏菌诊断技术》方法，采用虎红平板凝集试验对待检血清进行初筛，布病疑似阳性血清样品确诊时按照布病竞争ELISA抗体检测试剂盒使用说明书操作。

　　2结果与分析

　　2.1口蹄疫O型免疫抗体

　　结果判定标准按照农业农村部要求的O型口蹄疫液相阻断ELISA抗体效价≥1∶128为免疫抗体合格。O型口蹄疫免疫抗体检测结果见表1，可知A、B、C、D 4个奶牛场共计采样446份，被检牛群O型口蹄疫免疫抗体平均水平较高，合格率均明显高于农业农村部规定的70%，其中3家规模场的免疫合格率达100%。从检测结果可以看出，4个规模奶牛场对口蹄疫等重大动物疫病的强制免疫工作高度重视，且结合自身的实际情况制定了相应的免疫程序，保证了奶牛的群体保护率。

　　2.2病毒性腹泻免疫抗体

　　结果判定标准按照试剂盒说明算出临界值（S/P）进行比较，若S/P≥0.3判为抗体阳性；若0.2≤S/P＜0.3判为可疑；若S/P＜0.2判为抗体阴性。病毒性腹泻免疫抗体检测结果见表2，4个奶牛场中除C奶牛场病毒性腹泻免疫抗体合格率为66.13%，其余合格率均高于70%。虽然免疫抗体均高于国家标准，但在生产实践中该病仍属于常见多发病，各规模场除做好免疫工作外，也应定期开展“大清洗大消毒”工作，及时清理圈舍，将养殖环境中隐藏的病毒性腹泻病毒杀灭，减少牛群中隐形带毒奶牛的数量，是保证该病散发的前提。

　　2.3布鲁氏菌病抗体

　　布鲁氏菌病抗体检测结果见表3。通过虎红平板凝集试验进行初步检测，再将疑似阳性血清用布病竞争ELISA抗体检测试剂盒确诊，未检出阳性。通过检测结果可以看出，规模化奶牛场在布病等人畜共患病的防控工作中严格落实了检疫净化的防控政策，检疫净化工作成效较为显著。布病是重要的人畜共患病，是生产实践中对人威胁较大的动物疫病，也可通过牛奶污染养殖环境，因此规模化奶牛场应对该病引起高度重视。
 

　　3讨论

　　近年，在新疆政府有关部门和养殖场兽医工作者的不断努力下以及从业者防疫意识的不断提高，规模场奶牛场均已具备完善的疫苗免疫程序，在目前的规模化奶牛场中，口蹄疫免疫率覆盖率普遍较高，情况较为稳定。病毒性腹泻在规模化奶牛场中时有发生，常常导致牛食欲不振、腹泻、体重下降等症状，尤其是冬季，该病的发生率更高，对奶牛的健康和生产性能产生负面影响，免疫覆盖率处于一般水平[5]。随着我国牛种布鲁氏菌疫苗的问世，部分规模化奶牛场对产后母牛进行了布鲁氏菌A19疫苗株的免疫接种，但该疫苗具有一定的局限性，牛群接种可引起明显的局部反应[6]，甚至存在感染工作人员的风险。

　　本次研究结果显示，4个奶牛场的口蹄疫O型免疫抗体平均水平较高，合格率均高于农业农村部规定的70%，其中B、C和D 3家规模场奶牛养殖场的免疫合格率达100%，病毒性腹泻免疫抗体检测结果显示，除C规模化养殖场外，其余奶牛场的病毒性腹泻免疫抗体合格率均高于70%，而布鲁氏菌病抗体检测结果未检出阳性结果。通过此次试验可以看出，4个奶牛场针对口蹄疫和病毒性腹泻采取预防为主，针对布鲁氏菌病采取检疫净化为主的防控措施，在实施以检疫—隔离—治疗—检疫为主的综合防控措施后，达到控制和净化疫病的目的，保障生物安全[7]，也为北疆其他奶牛场疫病的防控提供了可资借鉴的技术措施。

　　4结论

　　北疆规模化奶牛场在口蹄疫、病毒性腹泻以及布鲁氏菌病的防控方面也取得了一定的成效，受北疆气候的影响，病毒性腹泻疾病值得特别关注，病畜通过排泄物或其他分泌物可向养殖环境中排毒，进而污染养殖环境或其他健康畜，规模化养殖场应加强“大清洗大消毒”工作，及时清理圈舍，保证圈舍的养殖环境干净卫生。有条件的奶牛场也可通过荧光PCR方法检测养殖环境及牛的病毒核酸污染状况，提升防控该病的效率，以确保奶牛群健康稳定生产，为乳制品生产提供保障。

　参考文献

　　[1]刘莉，胡永青，贾娜，等．新疆规模化奶牛场牛群结构调查与问题分析[J]．中国乳业，2021（12）：74-77.

　　[2]Ren H R，Li M T，Wang Y M，et al．The risk factor assessment of the spread of foot-and-mouth disease in mainland China[J].Theor Biol，2021，512：110 558.

　　[3]魏勇，宋洁，金庭辉，等．新疆规模化牧场奶牛病毒性腹泻病毒持续感染状况的流行病学调查[J]．中国乳业，2020（10）：43-46.

　　[4]Khurana S，Sehrawat A，Tiwari R，et al．Bovine brucellosis-A comprehensive review[J]．The Veterinary Quarterly，2021，41（1）：61-88.

　　[5]马兵祥．牛病毒性腹泻病毒发病机制和疫苗开发的最新进展[J].中国动物保健，2023，25（12）：100-101.

　　[6]徐锦凤，杨琨，张开礼．家畜布鲁氏菌病疫苗研究现状[J].畜禽业，2024，35（1）：29-31.

　　[7]应清香．规模乳牛场布鲁氏菌病净化与维持净化实践探索[J].福建畜牧兽医，2022，44（5）：72-75.