摘要：目的：采用QuEChER S结合高效液相色谱/串联质谱法建立了蒲公英、甘草、当归、党参、黄芪5种中药材中30种农药残留的快速分析方法。方法：样品用乙腈均质提取，经无水硫酸钠-PSA柱吸附净化，在MR M模式下进行质谱分析，外标法定量。结果：30种农药在1.0~100 ng/mL范围内具有良好的线性关系，相关系数均大于0.996。30种农药的平均加标回收率为90.3%~110%，RSD为0.9%~20%。结论：本方法灵敏、准确、高效，可用于同时进行药食同源中药材中30种农药残留的快速筛查与检测，为药食同源中药材的种植生产和质量管控提供数据参考。

　　关键词：QuEChER S；高效液相色谱-串联质谱法；药食同源；农药残留

　　随着中药材需求量的日益增长及野生资源的有限性，人工栽培得到大力发展，据调查我国80%的中药材来源于人工栽培[1-2]。为了减少病虫草害，提高产量，部分中药材在人工栽培过程中存在不合理使用农药的问题，造成农残超标[3-4]。农药残留在中药材中蓄积易产生毒性反应，如有机氯类农药有严重的神经毒性和脏器毒性[5]；有机磷类农药会抑制乙酰胆碱酯酶的活性，使神经传导功能紊乱[6]；氨基甲酸酯类农药具有潜在的肝脏毒性[7]。农药残留超标严重影响中药材的质量和安全，威胁人体健康，同时也制约了中药材产业的发展和推广[8-9]。因此，了解中药材农药残留现状，改善外源性污染具有重要意义。

　　随着大健康产业的兴起和人们健康意识的增强，“药食同源”中药材因兼具中药的“扶正”与食品的“营养”双重作用，越来越受到人们的青睐[10-13]。“药食同源”中药材生产和消费量逐年攀升，受众人群扩大化，食用形式多样化，从而使其质量问题受到特别关注[14-15]。目前针对市场上流通的“药食同源”中药材农药残留研究相对仍然较少。

　　QuEChERS（Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe）法在不同类别基质农药多残留微量分析中被广泛应用[16-17]。液相色谱-质谱联用法在农残检测中具有较高的灵敏度和良好的选择性等特点[18-20]，可同时实现多种农药成分的快速测定。本研究选取截至目前国*院卫生行政部门发布的三批次既是食品又是中药材名单中的蒲公英、甘草、当归、党参、黄芪5种中药材，通过液相色谱-质谱联用法（LC-MS）同时测定30种农药的残留量，为了解目前“药食同源”中药材农药残留存在的问题，建全和完善中药材中多种农药残留量检测方法，控制中药材的质量安全及制定最大残留限量，以及后续开发利用药材资源提供参考。

　　1仪器与材料

　　1.1仪器

　　三重四极杆串联液相色谱质谱仪，岛津LCMS-8050型，日本岛津公司；电子天平，瑞士梅特勒公司；QuEChERS固相萃取净化管，岛津公司。

　　1.2药品与试剂

　　甲胺磷、苯线磷、苯线磷砜、苯线磷亚砜、地虫硫磷、治螟磷、克百威、3-羟基克百威、胺苯磺隆、甲磺隆、氯磺隆、硫线磷、氯唑磷、甲拌磷、甲拌磷亚砜、甲拌磷砜、蝇毒磷、硫环磷、磷胺、涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜、久效磷、内吸磷、灭线磷、特丁硫磷砜、特丁硫磷亚砜、水胺硫磷、杀虫脒、甲基异柳磷标准物质，质量浓度均为1 000μg/mL，坛墨质检科技股份公司；乙腈：色谱纯，天津科密欧化学试剂有限公司；甲酸：优级纯，天津科密欧化学试剂有限公司；甲酸铵、无水硫酸镁、无水乙酸钠、冰醋酸，优级纯，福晨（天津）化学试剂有限公司；水，一级。

　　1.3药材

　　中药材蒲公英、甘草、当归、党参、黄芪等样品，市售。

　　2方法与结果

　　2.1实验条件

　　2.1.1色谱条件

　　高效液相色谱柱：Shim-pack 2.1×100 mm，1.9μm；进样体积1μL；流动相A：0.1%甲酸溶液（含5 mmol/L甲酸铵），流动相B：乙腈-0.1%甲酸溶液（含5 mmol/L甲酸铵）（体积比95∶5），按表1进行梯度洗脱；柱温为40℃,流速为0.3 mL/min。

　　2.1.2质谱条件

　　以三重四级杆串联质谱仪检测。离子源：电喷雾（ESI）；扫描模式：正离子；质谱监测模式：多反应监测（MRM）；电喷雾电压：3.5 kV；辅助气温度：350℃;辅助气流速：10 L/min。30种农药质谱参数见表2。

　　2.2溶液的制备

　　2.2.1混合对照品溶液

　　精密量取30种农药标准溶液1 mL，置于20 mL的量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀，置于4℃冰箱中储存。

　　2.2.2供试品溶液

　　取供试品粉末过三号筛，精密称定3 g置50 mL聚苯乙烯具塞离心管中，加入1%冰醋酸溶液15 mL，涡旋使药粉充分浸润，放置30 min，精密加入乙腈15 mL，涡旋混匀，置振荡器上剧烈振荡（500次/min）5 min，加入无水硫酸镁与无水乙酸钠的混合粉末（质量比4∶1）7.5 g，即刻摇散，再置振荡器上剧烈振荡（500次/min）3 min，冰浴10 min，离心（4 000 r/min）5 min，取上清液9 mL，置于已预先装有净化材料的分散固相萃取净化管（无水硫酸镁900 mg，N-丙基乙二胺（PSA）300 g，十八烷基硅烷键合硅胶300 mg，硅胶300 mg，石墨化炭黑90 mg）中，涡旋使混匀，再置振荡器上剧烈振荡（500次/min）5 min，使净化完全，离心（4 000 r/min）5 min，精密吸取上清液5 mL，置氮吹仪上在40℃条件下水浴浓缩至约0.4 mL，加乙腈定容至1.0 mL，涡旋混匀，用微孔滤头（0.22μm）过滤，即得供试品溶液。

　　2.2.3基质混合对照品溶液

　　取不含待测农药的中药材样品6份，每份3 g，用供试品溶液相同的制备方法处理至“置氮吹仪上在40℃水浴浓缩至约0.4 mL”，分别加入混合对照品储备液10、20、50、100、150、200μL，加乙腈稀释至1 mL，涡旋混匀，即得。

　　2.3方法学考察

　　2.3.1专属性实验

　　取混合对照品溶液适量，按“2.1”项下实验条件进行分析。结果表明，30种农药均能良好地分离。30种农药的总离子流图见图1。

　　2.3.2线性考察

　　分别精密吸取6个系列浓度的基质混合对照品溶液各1.0μL，进样分析，记录峰面积，以质量浓度（x，ng/mL）为横坐标、峰面积（y）为纵坐标，进行线性分析，得到标准曲线。结果表明，5种基质中，30种农药组分在质量浓度1.0~100 ng/mL范围内线性关系均良好（R＞0.996），详见表3—表7。

　　2.3.3定量限考察

　　将回收实验中的低浓度对照品溶液逐级稀释后进样分析，以信噪比10:1计算定量限。结果显示，30种农药的定量限满足《中国药典》2020年版四部0212药材和饮片检定通则规定要求。

　　2.3.4精密度和回收率实验

　　选择不含分析物的样品作为基质空白样品，粉碎（3号筛）后取3.0 g，共6份，精密称定，加入混合对照品溶液，进样分析，考察分析物的加标回收率及方法的精密度，结果见表8。结果表明，30种农药的加标回收率为90.3%~110%，RSD为0.9%~20%，表明该方法的精密度、准确度较高。

　　2.4样品的测定

　　取蒲公英、甘草、当归、党参和黄芪中药材样品各适量，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，分别精密吸取供试品溶液各1μL进样分析，记录峰面积并按外标法计算样品中30种农药残留量，结果显示30种农药在蒲公英、甘草、当归、党参和黄芪5种中药材中均未检出。

　　3讨论

　　农药残留量是评价中药材质量的重要指标之一。中药材农药残留量分析测定的重要步骤为中药材的前处理，一是要尽量完全提取待测组分，二是要尽可能除去样品中存在的杂质，以避免对色谱柱和检测器等造成污染，影响检测结果的准确性。本法的建立主要以《中国药典》（2020版）四部2341通则《2341农药残留量测定法》中新增第五法“药材及饮片（植物类）中禁用农药多残留测定法”中样品的制备方法为依据，采用QuEChERS前处理法，液质联用技术对蒲公英、甘草、当归、党参和黄芪5种中药材样品中30种农药残留测定。结果表明，经方法学验证后，在相应的测定范围内30种农药成分线性关系良好，精密度、重复性、回收率等试验符合相关要求。蒲公英、甘草、当归、党参和黄芪5种中药材样品中均未检测出30种农药残留，这可能是由于中药材使用前多经复杂炮制、贮藏，很多农药已大部分代谢，因此残留水平并不高。农药的残留量还可能与采样点的土壤、水质、使用的化肥农药、采收加工和储运环节，以及中药的种植条件和气候条件等外部因素的影响有关。

　　本研究初步了解了国内蒲公英、甘草、当归、党参和黄芪的质量和农药残留现状，对农药残留量的监管工作提供了一定的技术和数据参考，但对于制定出合理、符合蒲公英、甘草、当归、党参和黄芪现状的农药残留标准，还需对5种中药材栽培过程中的农药使用种类、剂量、使用时间和消解动态趋势进一步深入调研和研究。

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