【摘要】目的：探讨外周血白细胞介素（IL）-17、IL-18、IL-35水平与急性髓系白血病患者免疫表型的相关性。方法：回顾性分析2021年1月至2022年12月河南洛阳正骨医院收治的98例急性髓系白血病患者的临床资料，检测患者外周血IL-17、IL-18、IL-35水平和免疫表型，分析外周血IL-17、IL-18、IL-35水平与急性髓系白血病患者免疫表型的相关性。结果：98例急性髓系白血病患者多种髓系抗原呈阳性表达，其中CD13+占比最高（93.88%），其余依次为CD33+、CD117+、髓过氧化物酶（MPO）+和CD64+；CD13+、MPO+、CD64+患者IL-17水平均高于CD13-、MPO-、CD64-患者，CD13+、CD33+、CD64+患者IL-18水平均高于CD13-、CD33-、CD64-患者，CD13+、CD33+、CD117+患者IL-35水平均高于CD13-、CD33-、CD117-患者，差异有统计学意义（<0.05）；其他抗体阳性与阴性患者外周血IL-17、IL-18、IL-35水平比较，差异无统计学意义（>0.05）；Logistic回归分析结果显示，IL-17水平升高与免疫表型中CD13、MPO和CD64阳性表达相关，IL-18水平升高与免疫表型中CD13和CD33阳性表达相关，IL-35水平升高与免疫表型中CD13、CD33和CD117阳性表达相关（<0.05）。结论：急性髓系白血病患者外周血IL-17水平升高与免疫表型中CD13、MPO和CD64阳性表达相关，IL-18水平升高与免疫表型中CD13和CD33阳性表达相关，IL-35水平升高与免疫表型中CD13、CD33和CD117阳性表达相关。

　　【关键词】急性髓系白血病,免疫表型,相关性,白细胞介素-17,白细胞介素-18,白细胞介素-35

　　【Abstract】Objective:To investigate correlations among levels of interleukin(IL)-17,IL-18,IL-35 in peripheral blood and immunophenotypes in patients with acute myeloid leukemia.Methods:The clinical data of 98 patients with acute myeloid leukemia admitted to Henan Luoyang orthopedic hospital,from January 2021 to December 2022 were retrospectively analyzed.The levels of IL-17,IL-18,IL-35 in peripheral blood and the immunophenotypes were detected.The correlations among the peripheral blood IL-17,IL-18,IL-35 levels and the immunophenotypes in the patients with acute myeloid leukemia were analyzed.Results:A variety of myeloid antigens were positively expressed in the 98 patients with acute myeloid leukemia,of which CD13+accounted for the highest proportion(93.88%),followed by CD33+,CD11+,myeloperoxidase(MPO)+and CD64+.The levels of IL-17 in the patients with CD13+,MPO+and CD64+were higher than those in the patients with CD13-,MPO-and CD64-;the levels of IL-18 in the patients with CD13+,CD33+and CD64+were higher than those in the patients with CD13-,CD33-and CD64-;the levels of IL-35 in the patients with CD13+,CD33+and CD117+were higher than those in patients with CD13-,CD3-and CD117-;and the differences were statistically significant(<0.05).There were no significant differences in the levels of IL-17,IL-18 and IL-35 in peripheral blood among the patients with positive and negative other antibodies(>0.05).Logistic regression analysis showed that the increase of IL-17 level was related to the positive expression of CD13,MPO and CD64 in immunophenotype,the increase of IL-18 level was related to the positive expression of CD13 and CD33,and the increase of IL-35 level was related to the positive expression of CD13,CD33 and CD117(<0.05).Conclusions:The increase of IL-17 level in peripheral blood of the patients with acute myeloid leukemia is related to the positive expression of CD13,MPO and CD64 in immunophenotype;the increase of IL-18 level is related to the positive expression of CD13 and CD33;and the increase of IL-35 level is related to the positive expression of CD13,CD33 and CD117.

　　【Keywords】Acute myeloid leukemia;Immunophenotype;Correlation;Interleukin-17;Interleukin-18;Interleukin-35

　　急性髓系白血病是髓系造血干/祖细胞恶性疾病，以骨髓与外周血中原始和幼稚髓性细胞异常增生为主要特征，临床表现为眼底、球结膜出血，以及感染、发热、脏器浸润等症状[1]。已知不同免疫表型的急性髓系白血病患者预后不同[2]。免疫分型可为临床治疗方案的制订提供一定参考，有助于改善患者预后[3]。急性髓系白血病患者免疫功能下降，辅助性T细胞17相关的白细胞介素（IL）-17在其中发挥重要的调控作用；IL-35可发挥免疫负调控作用；IL-18可刺激白血病细胞的增殖[4-5]。本文探讨外周血IL-17、IL-18、IL-35水平与急性髓系白血病患者免疫表型的相关性。

　　1资料与方法

　　1.1一般资料回顾性分析2021年1月至2022年12月河南洛阳正骨医院收治的98例急性髓系白血病患者的临床资料。纳入标准：符合《成人急性髓系白血病（非急性早幼粒细胞白血病）中国诊疗指南（2017年版）》中相关诊断标准[6]；经分子生物学、骨髓穿刺等检查确诊为急性髓系白血病；35~80岁；临床资料完整。排除标准：近1个月内接受相关治疗；合并肝、肾等重要脏器功能障碍；患有其他恶性肿瘤。患者及其家属均了解本研究内容并签署知情同意书。其中男65例，女33例；年龄40~80岁，平均（56.15±10.26）岁；体质量指数20~26 kg/m2，平均（22.20±1.02）kg/m2；FAB分型：M0型13例，M1型14例，M2型13例，M3型8例，M4型10例，M5型14例，M6型10例，M7型16例。

　　1.2方法采集患者外周静脉血5 mL，加入肝素抗凝，4℃下保存待检，根据诊断需求，设计抗体组合方案，用BriCyte E6型流式细胞仪（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，粤械注准20142220183）经荧光四色方案（异硫氰酸荧光素、藻红蛋白、别藻蓝蛋白及叶绿素蛋白）鉴别免疫表型，抗体[CD13、CD33、CD117、髓过氧化物酶（MPO）、CD64]由深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司提供。加入抗体，避光孵育15 min，加入溶血素后混合均匀，裂解红细胞，室温下离心保存，加入200μL磷酸盐缓冲溶液待测。荧光阳性细胞髓系抗原以≥20%为阳性。采集患者空腹外周静脉血2 mL，以3000 r/min转速（离心半径15 cm）离心10 min后取血清，低温环境下保存待测。以酶联免疫吸附法测定血清IL-17、IL-18、IL-35水平。

　　1.3观察指标（1）统计患者免疫表型检测结果。（2）比较不同免疫表型患者外周血IL-17、IL-18、IL-35水平。（3）分析患者外周血IL-17、IL-18、IL-35水平与免疫表型的相关性。

　　1.4统计学方法采用SPSS 22.0统计学软件处理数据，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，计数资料以率（%）表示，采用Logistic回归分析外周血IL-17、IL-18、IL-35水平与患者免疫表型的关系，以P&lt;0.05为差异有统计学意义。

　　2结果

　　2.1急性髓系白血病患者免疫表型检测结果98例急性髓系白血病患者多种髓系抗原呈阳性表达，其中CD13+占比最高（93.88%），其余依次为CD33+、CD117+、MPO+和CD64+。见表1。

   
       2.2不同免疫表型患者外周血IL-17、IL-18、IL-35水平比较CD13+、MPO+、CD64+患者IL-17水平均高于CD13-、MPO-、CD64-患者，CD13+、CD33+、CD64+患者IL-18水平均高于CD13-、CD33-、CD64-患者，CD13+、CD33+、CD117+患者IL-35水平均高于CD13-、CD33-、CD117-患者，差异有统计学意义（<0.05）；其他抗体阳性与阴性患者外周血IL-17、IL-18、IL-35水平比较，差异均无统计学意义（>0.05）。见表2。

　
  　2.3急性髓系白血病患者外周血IL-17、IL-18、IL-35水平与免疫表型的相关性将急性髓系白血病患者外周血IL-17、IL-18、IL-35水平作为自变量，将有统计学意义的抗原作为因变量并赋值（抗原阳性为1，阴性为0），见表3；Logistic回归分析结果显示，IL-17水平升高与免疫表型中CD13、MPO和CD64阳性表达相关，IL-18水平升高与免疫表型中CD13和CD33阳性表达相关，IL-35水平升高与免疫表型中CD13、CD33和CD117阳性表达相关（<0.05）。见表4。

　　3讨论

　　检测免疫表型是诊断急性髓系白血病常见的方式，有利于患者早期分型诊断和治疗[7]。研究患者免疫表型与外周血指标水平的关系，可辅助诊断疾病，评估疾病进程和制订治疗方案[8]。IL-17是Th17细胞分泌的重要促炎细胞因子，可通过多种途径诱导多种促炎因子和趋化因子的表达，在白血病的发生和进展中发挥重要作用。IL-18可刺激Th1细胞产生γ干扰素、IL-2等细胞因子，促使自然杀伤细胞增殖、活化，发挥抗肿瘤作用。IL-35属于IL-12细胞因子家族，可通过控制细胞周期停滞在G1期，抑制Treg细胞增殖而发挥免疫抑制作用。上述3种因子均参与了急性髓系白血病的发生、发展，且指标检测方便，若各指标与急性髓系白血病患者免疫表型具有一定的相关性，不仅有利于辅助手段，还可指导患者的靶向治疗。

　　本研究结果显示，98例急性髓系白血病患者多种髓系抗原呈阳性表达，其中CD13+占比最高（93.88%），其余依次为CD33+、CD117+、MPO+和CD64+；CD13+、MPO+、CD64+患者IL-17水平均高于CD13-、MPO-、CD64-患者，CD13+、CD33+、CD64+患者IL-18水平均高于CD13-、CD33-、CD64-患者，CD13+、CD33+、CD117+患者IL-35水平均高于CD13-、CD33-、CD117-患者；Logistic回归分析结果显示，IL-17水平升高与免疫表型CD13、MPO和CD64阳性表达相关，IL-18水平升高与免疫表型CD13和CD33阳性表达相关，IL-35水平升高与免疫表型CD13、CD33和CD117阳性表达相关。分析原因为IL-17是Th17细胞的主要效应因子，Th17的表达会因肿瘤类型不同而表现出一定差异，肿瘤细胞会产生促进Th17细胞增殖的因子，促进Th17细胞分化、扩散，故患者的病情、免疫异常越严重则IL-17异常表达越明显[9]。CD13髓样细胞亚群能促进肿瘤生长和转移；MPO是髓系白血病的敏感特异性标志物；CD64为单核细胞，可与IgG高亲和结合。本研究中急性髓系白血病患

　　者以CD13+、CD33+表达多见，提示CD13和CD33对判断白血病细胞是否为髓系具有一定的诊断价值CD33可通过免疫酪氨酸抑制基序途径诱导白血病细胞凋亡，CD117在造血干细胞和其他类型细胞的表面表达，IL-35为细胞外分泌的细胞因子，可调控免疫细胞活性，使其有利于肿瘤生长，在多种肿瘤环境中占主导地位，主要负责免疫抑制，表明CD117表达可能与免疫表型诊断有一定的关联[10]。IL-18具有抗肿瘤的作用，但其与CD13、CD33抗体关系的临床相关研究较少，具体机制尚未明晰，有待今后作进一步研究。

　　综上所述，急性髓系白血病患者外周血IL-17水平升高与免疫表型中CD13、MPO和CD64阳性表达相关，IL-18水平升高与免疫表型中CD13和CD33阳性表达相关，IL-35水平升高与免疫表型中CD13、CD33和CD117阳性表达相关。

参考文献

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　　[6]中华医学会血液学分会白血病淋巴瘤学组.成人急性髓系白血病（非急性早幼粒细胞白血病）中国诊疗指南（2017年版）[J].中华血液学杂志，2017，38（3）：177-182.

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