【摘要】目的：探讨与分析螺旋断层调强放疗联合顺铂治疗中晚期非小细胞肺癌（non-small-cell lung cancer，NSCLC）的效果及对微小RNA-532-3p（micro RNA-532-3p，miR-532-3p）、丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases，MAPK）表达的影响。方法：选择2017年5月—2022年4月于天水市第二人民医院诊治的60例中晚期NSCLC患者作为研究对象，根据1∶1随机数表法分组原则将患者分为断层组30例与对照组30例。对照组给予顺铂化疗治疗，断层组在对照组治疗基础上给予螺旋断层调强放疗，比较两组疗效、毒副反应及治疗前后外周血CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞相对含量、血液miR-532-3p、MAPK相对表达水平。结果：断层组总有效率为90.0%，高于对照组的60.0%，差异有统计学意义（P<0.05）。断层组治疗期间胃肠道反应、血液学毒性、肝肾功能损害、神经系统毒性等毒副反应发生率与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后，两组外周血CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞相对含量高于治疗前，且断层组高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后，两组血液miR-532-3p、MAPK相对表达水平低于治疗前，且断层组低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：螺旋断层调强放疗联合顺铂治疗中晚期NSCLC患者能提高临床效果，不会增加毒副反应发生率，还可提高外周血CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞相对含量，降低血液miR-532-3p、MAPK相对表达水平。

　　【关键词】螺旋断层调强放疗,顺铂,非小细胞肺癌,毒副反应

　　[Abstract]Objective:To investigate and analyze the effect of helical tomotherapy combined with Cisplatin in the treatment of advanced non-small-cell lung cancer(NSCLC)and its influence on the expression of micro RNA-532-3p(miR-532-3p)and mitogen activated protein kinases(MAPK).Method:From May 2017 to April 2022,atotal of 60 patients with advanced NSCLC who diagnosed and treated in Tianshui Second People's Hospital were selected as the research objects,the patients were divided into the tomographic group(30 cases)and the control group(30 cases)according to the grouping principle of 1∶1 random number table method.The control group was given Cisplatin chemotherapy,and the tomographic group was given helical tomotherapy on the basis of the control group.The efficacy,toxic and side effects,relative contents of peripheral blood CD3+T lymphocytes and CD4+T lymphocytes,relative expression levels of blood miR-532-3p and MAPK before and after treatment were compared between two groups.Result:The total effective rate of the tomographic group was 90.0%,which was significantly higher than 60.0%of the control group,and the difference was statistically significant(P&lt;0.05).There were no significant differences in the incidence of gastrointestinal reaction,hematological toxicity,liver and kidney function damage,nervous system toxicity in the tomographic group during treatment compared with those in the control group (P>;0.05).After treatment,the relative contents of CD3+T lymphocytes and CD4+T lymphocytes in peripheral blood of two groups were higher than those before treatment,and which in the tomographic group were higher than those in the control group,the differences were statistically significant(P&lt;0.05).After treatment,the relative expression levels of miR-532-3p and MAPK in blood of two groups were lower than those before treatment,and which in the fault group were lower than those in the control group,the differences were statistically significant(P&lt;0.05).Conclusion:Helical tomotherapy combined with Cisplatin in the treatment of advanced NSCLC patients can improve the clinical effect without increasing the incidence of toxic and side effects,it can also increase the relative content of CD3+T lymphocytes and CD4+T lymphocytes in peripheral blood and reduce the relative expression levels of miR-532-3p and MAPK in blood.

　　[Key words]Helical tomotherapy Cisplatin Non-small cell lung cancer Toxic and side effects Micro RNA-532-3p Mitogen activated protein kinase
　　当前肺癌的发病率和死亡率一直居高不下，非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）为肺癌的主要类型之一，占肺癌总数的80.0%左右[1]。NSCLC的生长分裂较慢，扩散转移较晚，早期没有特征性临床症状，不易受到患者重视[2]。中晚期NSCLC患者在临床上主要表现为咯血、呼吸困难等症状，很难通过手术进行切除根治[3-4]。对于中晚期NSCLC患者，当前在临床上多采用放疗与化疗治疗，特别是顺铂为常见的化疗药物，但是长期进行化疗效不佳。放射治疗可加强化疗的效果，但如果不当使用放疗可对周围正常细胞产生一定的负面影响[5]。螺旋断层放疗系统属于扇形螺旋照射的一种调强放疗系统，通过新型图像进行引导，利用计算机断层扫描的方式实现放疗的技术[6]。目前已有研究报道，螺旋断层放射治疗系统对NSCLC患者的治疗效果较佳，能改善患者的总生存及无进展生存情况，且能耐受治疗中的不良反应[7]。丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）是细胞内的重要信号系统，可参与调节细胞凋亡过程，也可诱发大量炎症因子的释放[8]。微小RNA是一类长度约为23个核苷酸的内源性非编码RNA，微小RNA-532-3p（micro RNA-532-3p，miR-532-3p）可参与调节肿瘤的增殖与分化，也可调节肿瘤的免疫发生过程[9-10]。本文具体探讨与分析了螺旋断层调强放疗联合顺铂治疗NSCLC的效果及对miR-532-3p、MAPK表达的影响，以明确螺旋断层调强放疗的价值，现报告如下。

　　1资料与方法

　　1.1一般资料

　　选择2017年5月—2022年4月于天水市第二人民医院诊治的60例中晚期NSCLC患者作为研究对象。纳入标准：（1）年龄40~75岁；（2）治疗期间未发生死亡；（3）均经病理组织活检确诊；（4）均初次确诊；（5）身体状况能耐受化疗与放疗。排除标准：（1）临床资料缺乏；（2）妊娠期及哺乳期妇女；（3）合并其他部位恶性肿瘤；（4）凝血功能障碍；（5）依从性不佳，拒绝配合。根据1∶1随机数表法分组原则将患者分为断层组30例与对照组30例。断层组与对照组年龄、体重指数、临床分期、病理类型、组织学分化程度比较。差异无统计学意义（P&gt;0.05），有可比性，见表1。本研究经医院医学伦理委员会批准，患者及家属均知情同意并签署知情同意书。

　　1.2方法

　　1.2.1对照组给予顺铂化疗，将顺铂（生产厂家：云南植物药业有限公司，批准文号：国药准字H53021740，规格：2 mL∶10 mg）25 mg/m2加入0.9%氯化钠注射液（生产厂家：山东齐都药业有限公司，批准文号：国药准字H37020764，规格：500 mL）500 mL中静脉滴注，连续治疗1~3 d，21 d为1个周期，治疗观察4个周期。

　　1.2.2断层组在对照组治疗基础上给予螺旋断层调强放疗，具体如下：（1）选择美国GE Discovery RT大孔径定位CT模拟定位扫描定位机（配套三维固定架和真空体袋固定装置）和美国瓦里安Clinac IX医用电子直线加速器。（2）工作站将正常器官与靶区画出后，开始传输CT图像，当发送到Tomotherapy治疗计划系统后开始照射靶区，肿瘤靶区给予60~70 Gy，临床靶区给予40~60 Gy。CT模拟实现定位扫描，层厚5 mm。三维图像重建后，放疗计划的单次剂量为2.0~2.5 Gy，5次/周，总剂量为59.8~66.0 Gy，1周为1个周期，治疗观察4个周期。

　　1.3观察指标及评价标准

　　比较两组疗效、毒副反应及治疗前后外周血CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞相对含量、血液miR-532-3p、MAPK相对表达水平。（1）疗效评价标准：肿瘤病灶消失，且维持时间≥4周为完全缓解；肿瘤病灶长径总和缩小≥30.0%，维持时间≥4周，同时未出现新发病灶为部分缓解；肿瘤病灶长径总和有缩小但未达部分缓解或有增加但未达恶化，维持时间≥4周为稳定；未达到以上标准甚至恶化为恶化。总有效率=（完全缓解+部分缓解）例数/本组例数×100%。（2）毒副反应：记录与观察断层组与对照组治疗期间毒副反应发生情况，包括胃肠道反应、血液学毒性、肝肾功能损害、神经系统毒性等。（3）外周血CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞相对含量：两组治疗前后抽取外周静脉血4~6 mL，以3 000 r/min离心10 min后去除上层清液，采用流式细胞仪对外周血CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞进行相对含量的测定，严格遵守操作说明书进行操作。（4）miR-532-3p、MAPK：两组治疗前后抽取外周静脉血4~6 mL，使用Trizol试剂提取血清中总RNA，再使用反转录试剂盒将合格的总RNA逆转录成为互补DNA后保存于-40.0℃冰箱，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）方法检测miR-532-3p相对表达水平；采用酶联免疫吸附法检测患者血清MAPK水平，试剂盒购自上海酶联生物，严格遵守试剂盒使用规则进行操作。

　　1.4统计学处理

　　采用SPSS 24.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x-±s）表示，组间比较采用独立样本t检验，组内比较采用配对t检验，计数资料以率（%）表示，比较采用χ2检验，检验水准为α=0.05，以P&lt;0.05为差异有统计学意义。

　　2结果

　　2.1两组疗效比较

　　断层组总有效率90.0%，高于对照组的60.0%，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

　　2.2两组治疗期间毒副反应发生情况比较

　　断层组治疗期间胃肠道反应、血液学毒性、肝肾功能损害、神经系统毒性发生率与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表3。

　　2.3两组治疗前后外周血CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞相对含量比较
      治疗前，两组外周血CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞相对含量比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后，两组外周血CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞相对含量高于治疗前，且断层组高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表4。

　　2.4两组治疗前后血液miR-532-3p、MAPK相对表达水平比较

　　治疗前，两组血液miR-532-3p、MAPK相对表达水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后，两组血液miR-532-3p、MAPK相对表达水平低于治疗前，且断层组低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表5。

　　3讨论

　　当前NSCLC对人们健康的威胁日益严重，虽然当前治疗方法与药物不断推陈出新，但患者的5年死亡率依然居高不下[11]。顺铂化疗为NSCLC的主要治疗方法，能有效控制病情，延长生存时间，提高患者的生活质量[12]。但是化疗效果也无法持续提高，且很多患者可能存在化疗抵抗性，提高化疗剂量容易产生各种毒副反应[13]。当前对NSCLC的常规放疗强调基本都是放射治疗。在临床上此项技术是一种常用的立体定向放射治疗，可促使照射线显著分布集中在病灶范围，减少对周边正常组织的影响，但是放疗疗效也有待提高[14]。螺旋断层调强放疗是一种现代化的放疗技术，其采用相等的51个投影波束角和64个二进制的准直器叶片连续平移和移动，可让患者得到螺旋式的照射效果[15]。螺旋断层调强放疗具有更多的照射视野，放射线照射可更加充分，可提高放疗剂量分布的均匀性与适形度[16]。本文具体探讨与分析了螺旋断层调强放疗联合顺铂治疗NSCLC的效果及对miR-532-3p、MAPK表达的影响。

　　本研究显示，断层组总有效率为90.0%，高于对照组的60.0%；断层组治疗期间胃肠道反应、血液学毒性、肝肾功能损害、神经系统毒性发生率与对照组比较，无显著差异。表明螺旋断层调强放疗联合顺铂治疗NSCLC不增加毒副反应的发生，但能提高患者的总体治疗效果。从机制上分析，螺旋断层调强放疗的扫描剂量较低，每天均可指导进行摆位扫描，在病灶区间可实现高剂量照射，还可对周围器官与组织进行有效保护，从而持续提高对患者的治疗效果。

　　顺铂为NSCLC的主要治疗方法，但是患者长期给予顺铂治疗容易产生药物依赖性与抵抗性，可影响患者的免疫功能。螺旋断层放疗加速器能创造双能兆伏级X射线，不仅可对患者进行扫描，还能根据肿瘤形状进行理想的精准放疗，可减少治疗误差，使计划与实施相吻合。细胞免疫是当前恶性肿瘤的研究重点，肿瘤患者多处于免疫抑制状态[17]。本研究显示，断层组与对照组治疗后外周血CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞相对含量高于治疗前，且断层组治疗后外周血CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞相对含量高于对照组。表明螺旋断层调强放疗联合顺铂治疗NSCLC能改善患者的免疫功能。

　　NSCLC发生的具体机制还不明确，涉及多种信号途径的异常表达。其中MAPK是细胞内重要的信号传递因子，可调控细胞增生、细胞凋亡、细胞分化等。尤其是MAPK的高表达可诱导释放大量炎症因子，还可导致血管内皮细胞受损，可诱发肿瘤的发生[18]。微小RNA是一类长度很短、高度保守的非编码调控单链RNA，可在表观遗传学通过抑制靶基因的翻译与转录，来调节靶基因的表达。miR-532-3p可参与调节生命的重要过程等，包括细胞增殖、细胞凋亡、脂肪代谢、肿瘤发生、肿瘤侵袭、肿瘤转移等。尤其是miR-532-3p在调节肿瘤发生过程中发挥重要作用，可反映非小细胞肿瘤患者的病情状况，也与患者的预后存在相关性，如淋巴结转移阳性的恶性肿瘤患者血清miR-532-3p水平与淋巴结转移阴性患者相比明显提高[19]。本研究显示，断层组与对照组治疗后血液miR-532-3p、MAPK相对表达水平低于治疗前，且断层组低于对照组。表明螺旋断层调强放疗联合顺铂治疗NSCLC能降低血液miR-532-3p、MAPK相对表达水平。从机制上分析，顺铂是一种铂类金属化合物，其与DNA结合后可破坏DNA的功能与结构，还可阻断DNA复制和DNA转录，不过顺铂的长期使用很难持续改善患者预后。螺旋断层调强放疗可满足靶区高剂量放疗的要求，并对正常肺组织的射野出束角度进行不同程度的遮挡，能有效校正摆位误差，对正常组织的影响较小，可有利于患者康复，从而有利于患者血液miR-532-3p、MAPK相对表达水平恢复正常。由于涉及一定患者受限的问题，本研究调查人数过少，收集的患者数量存在一定的偏倚性，观察指标也较少，将在后续研究中探讨。

　　综上所述，螺旋断层调强放疗联合顺铂治疗NSCLC患者能提高临床效果，不会增加毒副反应发生率，还可提高外周血CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞相对含量，降低血液miR-532-3p、MAPK相对表达水平。

　   参考文献

　　[1]朱金亮，秦其荣，刘孟钰，等.马鞍山市肺癌筛查队列肺结节转归及影响因素研究[J].现代预防医学，2022，49（14）：2517-2522.

　　[2]LE P C，POUREL N，BARLESI F，et al.Postoperative radiotherapy versus no postoperative radiotherapy in patients with completely resected non-small-cell lung cancer and proven mediastinal N2 involvement(Lung ART):an open-label，randomised，phase 3 trial[J].Lancet Oncol，2022，23（1）：104-114.

　　[3]LEE K，LE T，HAU E，et al.A systematic review into the radiologic features predicting local recurrence after stereotactic ablative body radiotherapy(SABR)inpatients with non-small cell lung cancer(NSCLC)[J].IntJ Radiat Oncol Biol Phys，2022，113（1）：40-59.

　　[4]桂国华，畅龙，胡炎兴，等.血清CEA、Dickkopf-1检测联合低剂量螺旋CT扫描在肺癌早期诊断中的价值分析[J].中国CT和MRI杂志，2022，20（1）：67-70.

　　[5]杨帆，王琛.能谱CT及螺旋CT对老年肺癌病理类型的诊断价值[J].局解手术学杂志，2022，31（5）：415-418.

　　[6]DIEZ P，HANNA G G，AITKEN K L，et al.UK 2022 consensus on normal tissue dose-volume constraints for oligometastatic，primary lung and hepatocellular carcinoma stereotactic ablative radiotherapy[J].Clin Oncol(R Coll Radiol)，2022，34（5）：288-300.

　　[7]胡小龙，李宏奇，刘鹤飞，等.螺旋断层放射治疗系统根治性放射治疗29例寡转移非小细胞肺癌的临床效果研究[J].中国医学装备，2017，14（6）：65-68.

　　[8]GAEBE K，LI A Y，PARK A，et al.Stereotactic radiosurgery versus whole brain radiotherapy in patients with intracranial metastatic disease and small-cell lung cancer:asystematic review and meta-analysis[J].Lancet Oncol，2022，23（7）：931-939.

　　[9]吴骏翔，唐斌，康盛伟，等.螺旋断层动态钨门技术在肺癌立体定向放疗中的应用[J].中国医疗设备，2022，37（4）：43-46.

　　[10]孔令芹，张晓敏，李西川，等.低剂量螺旋CT在肺癌筛查中的应用[J].中国肺癌杂志，2022，25（9）：678-683.

　　[11]朱振国，张军祥，杜东海.螺旋CT联合血清肿瘤标记物早期诊断肺癌的价值观察[J].中国CT和MRI杂志，2022，20（8）：68-70，76.

　　[12]OKAZAKI S，SHIBUYA K，TAKURA T，et al.Cost-effectiveness of carbonion radiotherapy versus stereotactic body radiotherapy for non-small-cell lung cancer[J].Cancer Sci，2022，113（2）：674-683.

　　[13]PETERS S，PUJOL J L，DAFNI U，et al.Consolidation Nivolumab andIpilimumab versus observation in limited-disease small-cell lung cancer after chemo-radiotherapy-results from the randomised phaseⅡETOP/IFCT 4-12 STIMULI trial[J].Ann Oncol，2022，33（1）：67-79.

　　[14]李辉，胡树志，李首崇.多层螺旋CT在诊断肺小结节及早期肺癌的价值及其与病理结果对比分析[J].中国实验诊断学，2021，25（8）：1139-1141.

　　[15]林博裕，谷志涛，方文涛.亚肺叶切除在含磨玻璃样成分的早期肺腺癌中的研究现状及进展[J].中华医学杂志，2021，101（33）：2641-2644.

　　[16]SCHOENFELD J D，GIOBBIE-HURDER A，RANASINGHE S，et al.Durvalumab plus Tremelimumab alone or in combination with low-dose or hypofractionated radiotherapy in metastatic non-small-cell lung cancer refractory to previous PD(L)-1 therapy:an open-label,multicentre,randomised,phase 2 trial[J].Lancet Oncol，2022，23（2）：279-291.

　　[17]TULLY K M，TENDLER S，CARTER L M，et al.Radioimmunotherapy targeting delta-like ligand 3 in small cell lung cancer exhibits antitumor efficacy with low toxicity[J].Clin Cancer Res，2022，28（7）：1391-1401.

　　[18]ZHOU S，MENG Y，SUN X，et al.The critical components for effective adaptive radiotherapy inpatients with unresectable non-small-cell lung cancer:who,when and how[J].Future Oncol，2022，18（31）：3551-3562.

　　[19]MERIE R，GEE H，HAU E，et al.An overview of the role of radiotherapy in the treatment of small cell lung cancer-a mainstay of treatment or a modality in decline?[J].Clin Oncol(R Coll Radiol)，2022，34（11）：741-752.